"WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
WA 09; WA-09; WA9; H9; H9.hESCs; H9 ESC; H9 hES; H9ES; GE09; WAe003-A; WICELLe003-A; WAe009-A; WA09-PCBC; PCBC02hse2014030502; SC14-067; UKERe008-A
传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术,其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中,细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落,影响后续传代效率;而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明,细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟,具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面,当使用较高浓度(0.25%胰酶-EDTA)时,消化时间应缩短至1-2分钟;若使用较低浓度(0.05%),则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化,当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。
血清作为细胞培养基的重要成分,为细胞生长提供了必需的营养物质和生长因子。当细胞增殖速率异常时,可考虑逐步提高血清浓度至15-20%。这一范围的血清浓度能够为细胞提供更丰富的营养支持,促进其增殖。然而,这一过程必须谨慎进行。建议将血清浓度的提升分为2-3个阶段,每个阶段维持3-5天,让细胞有足够的时间适应新的环境。例如,可以从常规的10%血清浓度开始,先提升至12-15%,观察细胞状态后再决定是否继续提高至15-20%。
【背景信息】
WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱H9细胞是HUT78(ACTIB161)的克隆系(Callo,RC,etal)。细胞表面带有CD3、CD4标记。研究表明,该细胞系对人体免疫缺陷病毒(HIV-1)敏感,可用于检测、分离和增殖HIV-1,也可用于其它人类ell病毒的研究。
【传代比例】
1:2-1:4(WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
细胞消化具体操作如下:先用PBS缓冲液冲洗细胞表面1-2次,每次10ml,以去除残留的血清和代谢废物。冲洗后弃去PBS液。向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1ml。将细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。消化时间需根据细胞类型和环境温度灵活调整,通常为1-3分钟。消化过程中可轻轻晃动培养瓶,以促进细胞脱落。当显微镜下观察到细胞间隙增大、细胞变圆并开始脱落时,即可终止消化。加入10ml细胞培养液以中和胰蛋白酶的活性,避免过度消化对细胞造成损伤。
细胞根据其形态和功能可以分为多种类型,其中上皮细胞、成纤维细胞和淋巴母细胞是常见的三种类型。成纤维细胞,或称纤维母细胞,是一种存在于蜂窝组织或纤维结缔组织中的梭形细胞,能够分泌构成细胞外基质(ECM)的结构蛋白。这类细胞最初由德国病理学家鲁道夫·菲尔绍与法国解剖学家马蒂亚斯·杜瓦尔于19世纪中叶描述。成纤维细胞特异性标志物包括FAP(成纤维细胞激活蛋白)、α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)、骨膜蛋白、PDGFRα(血小板衍生生长因子受体α)、胶原蛋白、波形蛋白、纤连蛋白和胸腺细胞抗原1等。成纤维细胞在形态上是扁平的纺锤形细胞,缺乏基底膜,细胞核呈圆形拉长,被巨大的内质网包围。在培养中,它们表现出不同的形态学和生化特征,这取决于其起源位置、分化状态和培养条件。
【物种来源】
WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化WA09 Cells人胚胎干细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
直接倒掉上清液能够提高操作效率,节省时间。但这种方式存在一定风险,直接倾倒时较难控制力度和角度,如果操作不慎,容易使细胞沉淀随着上清液一起流出,导致细胞损失,而且可能会因液体快速流下冲击细胞沉淀造成细胞的物理性损伤。在实际的细胞传代操作中,应根据细胞的特性、实验的要求以及个人的操作熟练程度来选择合适的上清液处理方式。对于新手或者处理珍贵细胞系时,建议优先采用移液枪吸走的方式,以保障细胞的活性和传代的成功率。而在积累了丰富经验且对实验条件有充分把握的情况下,可以根据具体情况灵活运用直接倒掉上清液的方法,在保证实验质量的同时提高工作效率。
U343MG Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:JM-Jurkat细胞、RPMI 1788细胞、U87-MG细胞
HEK-293F Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;悬浮生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞
HFT-8810 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H1155细胞、TJ905细胞、Capan2细胞
MGECs Cells;背景说明:肾小球;内皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SKBR-3细胞、Hs 611.T细胞、QBC(939)细胞
PK 15 Cells;背景说明:PK-15细胞建系于1955(Stice,E)。是PK-1a细胞的克隆系。该细胞系可用于多种病毒的增值及特性研究。另外,电镜观察发现,PK-15细胞内有C-型病毒颗粒存在,是研究C-型病毒的材料。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞
GMK-5 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 PINK1 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
C26 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞
SW 1417 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:4传代,每周换液1-2次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:OB2细胞、SKMEL1细胞、U-2 OS细胞
WB-F344 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞
SMA-560 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、801-D细胞、Tu-686细胞
WM115F Cells;背景说明:黑色素瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞
JM-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:换液2-3次一周;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:RPMI No. 1846细胞、Clone Y-1细胞、H7721细胞
MUTZ-1 Cells;背景说明:骨髓增生异常综合征;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞
NCI-H2228 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代,每周2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HEM细胞、CaES-17细胞、Jiyoye(P-2003)细胞
HSR-5 Cells(提供STR鉴定图谱)
KP-N-RT-LN Cells(提供STR鉴定图谱)
MOPC-315 Cells(提供STR鉴定图谱)
NYSCF-10005-709-709-Skin-mR-iPSC Cells(提供STR鉴定图谱)
RH [Human] Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene NCI-H1299 SCARB2 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
YPEN-2 Cells(提供STR鉴定图谱)
HCC4006-GR-step Cells(提供STR鉴定图谱)
HPMC Cells;背景说明:腹膜间皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:FF-WT-BJ细胞、HEL-92_1_7细胞、RFL6细胞
DMS79 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞
HOC-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SCC 25细胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、H-2023细胞
IGR-OV1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H1734细胞、EMT6细胞、MFD-1细胞
BC-022 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞
BC-022 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞
L6 Cells;背景说明:该细胞是Yaffe在甲基胆蒽存在的情况下从大鼠大腿肌原代培养的最初两代细胞中分离得到的;在培养基中融合形成多核的肌管和横纹肌纤维,细胞融合的程度随着代数的增加而下降,因此细胞应低代次冷冻并周期性地重新克隆以选择融合能力强的细胞。鼠痘病毒阴性。该细胞应在达汇合状态前传代,以延缓细胞分化能力的丧失。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:成肌细胞样;相关产品有:SKCO 1细胞、DU4475细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞
GM00637F Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:TMD-8细胞、H766T细胞、X63-Ag8细胞
AMJ2C8 Cells;背景说明:巨噬细胞;J2病毒转化;C57BL/6J;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Capan 2细胞、BE2C细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞
Pfeiffer Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:L-Wnt-3A细胞、OCILY7细胞、MFHL-2细胞
BBE Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:6—1:10传代,每周换液2次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:Kupffer细胞、Y1细胞、HuCCT-1细胞
BC-027 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MOVAS细胞、SW 620细胞、CT-26 WT细胞
UWB1-289 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:A2780/CP细胞、HHFK细胞、DBTRG-05MG细胞
H-82 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:5传代,每周换液2-3次;生长特性:悬浮生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:NCIH295R细胞、HEL 299细胞、PG-BE1细胞
LN-18 Cells人脑胶质母细胞瘤细胞|有STR图谱
OVCAR-8 Cells人卵巢癌腺癌细胞|有STR图谱
MRC-5 Cells人胚肺细胞|有STR图谱
Marcus Cells人星形胶质细胞瘤细胞|有STR图谱
PC-12 Cells大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞|有STR图谱
CT26.WT Cells小鼠结肠癌细胞|有STR图谱
Hepa 1-6/OVA Cells小鼠肝癌细胞|有STR图谱
HFL1 Cells人胚肺成纤维细胞|有STR图谱
H1 Cells人胚胎干细胞|有STR图谱
CoC1 Cells人卵巢癌细胞|有STR图谱
Panc 03.27 Cells人胰腺癌细胞|有STR图谱
RD-ES Cells人尤文氏肉瘤细胞|有STR图谱
UMR-106-luc Cells大鼠骨肉瘤细胞|有STR图谱
WSU-DLCL-2-LUC Cells人弥漫大B淋巴瘤细胞|有STR图谱
HFSF Cells人胚胎眼巩膜成纤维细胞|有STR图谱
IGROV-1 Cells人卵巢癌细胞|有STR图谱
CL-11 Cells人结肠癌细胞|有STR图谱
K562/Adr Cells人慢性髓系白血病细胞|有STR图谱
XWLC-05-GFP Cells人肺腺癌细胞|有STR图谱
A-549 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱
TTA-1 Cells人甲状腺癌细胞|有STR图谱
EA.hy 926-GFP Cells人脐静脉融合细胞|有STR图谱
LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞|有STR图谱
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HCC1143 Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱
CL-11 Cells人结肠癌细胞|有STR图谱
Anglne Cells人卵巢癌细胞|有STR图谱
SK-MEL-2 Cells人皮肤黑色素瘤细胞|有STR图谱
HuT 78 Cells人T淋巴细胞白血病细胞|有STR图谱
P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞|有STR图谱
CTX TNA2 Cells大鼠脑I型星形胶质细胞|有STR图谱
PLA-801D Cells人高转移肺癌细胞|有STR图谱
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Li-7 Cells人肝癌细胞|有STR图谱
NCI-H2347 Cells人肺癌细胞|有STR图谱
SF126 Cells人脑瘤细胞|有STR图谱
MB49 Cells小鼠膀胱癌细胞|有STR图谱
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