"HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱
背景信息:HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱该细胞属源于正常肾的近曲小管细胞,通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2,Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317,Zui后将PA317产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。
HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱英文别名::Hk-2; HK2; Human Kidney-2
传代比例:1:2-1:4(HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱首次传代建议1:2)
来源说明:HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
该细胞系常规采用基础培养基进行培养,如DMEM或RPMI-1640等。基础培养基提供了细胞生长所需的基本营养物质,包括氨基酸、维生素、无机盐和葡萄糖等。为了满足细胞的生长需求,还需在基础培养基中添加以下成分:胎牛血清(FBS),添加比例为10%-20%;青霉素-链霉素双抗溶液,添加比例为1%,但需注意,长期使用抗生素可能掩盖潜在的污染问题,因此建议定期进行无菌检测。
生长特性:HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱贴壁生长
形态特性:HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱上皮细胞样
换液周期:HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱每周2-3次
产品包装:复苏发货:HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
物种来源:HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
培养条件:37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
消化传代:使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
污染防控:严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
细胞状态:传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
培养观察:定期观察HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。细胞复苏:复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
当T25瓶复苏细胞收到货时,请观察好细胞状态后,将T25细胞瓶壁进行75%酒精消毒,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态,当细胞密度达80%-90%,即可进行首次传代培养;干冰运输的细胞冻存管收到货后,需立即转入液氮保存或直接进行复苏(第三天换液并检查复苏细胞密度,以便进行下一步)。 能够在实验室条件下进行大量培养和繁殖。这种细胞系在分子生物学和生物技术研究中十分常用。
细胞在-196℃液氮环境中,其代谢活动近乎完全停止,理论上可实现无限期保存。冻存过程的核心在于控制冰晶形成:细胞内水分在冻结前需充分透出,避免冰晶刺穿细胞膜。保护剂DMSO(二甲基亚砜)通过降低培养基冰点(可使冰点降至-60℃),同时改变细胞膜磷脂双分子层的相变温度,显著提升细胞存活率。研究表明,10% DMSO浓度可使细胞复苏存活率达90%以上。
细胞传代:传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
污染检测:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
细胞接收流程:收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。操作规范:在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
消化条件:室温下用胰酶消化1-3分钟。
生物安全等级:1级。
空泡现象:在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
血清比例:使用10%-20%的血清浓度有助于优化HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
对于常规贴壁细胞,标准操作流程应遵循三步原则:首先用PBS润洗去除血清中的酶抑制剂,随后进行胰酶润洗并彻底吸除,最后依靠残留酶在37℃下的短暂作用完成消化。这个过程中,判断消化终点的标准常被错误理解。实际上,当显微镜下观察到细胞层呈现""沙状移动""时,表明细胞-基质和细胞-细胞间的连接均已断裂,此时应立即终止消化。这种状态下的细胞虽未完全离散,但已具备独立分布的特性。值得注意的是,某些肿瘤细胞即使在镜下呈现理想单细胞状态,贴壁后仍会重新聚集,这是由其生物学特性决定的自然现象,强行通过延长消化或剧烈吹打来追求绝对单分散性,只会导致细胞状态持续恶化。
直接倒掉上清液能够提高操作效率,节省时间。但这种方式存在一定风险,直接倾倒时较难控制力度和角度,如果操作不慎,容易使细胞沉淀随着上清液一起流出,导致细胞损失,而且可能会因液体快速流下冲击细胞沉淀造成细胞的物理性损伤。在实际的细胞传代操作中,应根据细胞的特性、实验的要求以及个人的操作熟练程度来选择合适的上清液处理方式。对于新手或者处理珍贵细胞系时,建议优先采用移液枪吸走的方式,以保障细胞的活性和传代的成功率。而在积累了丰富经验且对实验条件有充分把握的情况下,可以根据具体情况灵活运用直接倒掉上清液的方法,在保证实验质量的同时提高工作效率。
Detroit 562 Cells人咽喉癌细胞复苏中心|有STR图谱
143B-RFP Cells人骨肉瘤细胞复苏中心|有STR图谱
OVCAR-8/ADR Cells人卵巢浆液性腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
IPEC-J2 Cells猪小肠上皮细胞复苏中心|有STR图谱
HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱
BALL-1 Cells人B淋巴细胞急性白血病细胞复苏中心|有STR图谱
U-87MG-RFP Cells人脑星形胶质母细胞瘤细胞复苏中心|有STR图谱
7E3-E8 Cells(提供STR鉴定图谱)
KY-270 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:5传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:B78细胞、H1688细胞、COV362细胞
JKT-1 Cells;背景说明:精原瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞
Nthy-ori 3.1 Cells;背景说明:甲状腺;SV40转化;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CL 1-5细胞、LLC-PK(1)细胞、IPEC1细胞
HGMC Cells;背景说明:肾小球系膜;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MFE 296细胞、DSL-6A/C1细胞、OVCAR-8细胞
BHT-101 Cells人甲状腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
UMNSAH/DF-1 Cells鸡成纤维细胞复苏中心|有STR图谱
BT-549 Cells人乳腺管癌细胞复苏中心|有STR图谱
HCT 116 Cells人结肠癌细胞复苏中心|有STR图谱
LNCaP-Luc Cells人前列腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
RTgill-W1[ATCC CRL-2523] Cells鱼鳃细胞复苏中心|有STR图谱
COV 504 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:HGBEC细胞、NCI-H520细胞、L-132细胞
MGECs Cells;背景说明:肾小球;内皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SKBR-3细胞、Hs 611.T细胞、QBC(939)细胞
L-540 Cells;背景说明:霍奇金淋巴瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞
NR-8383 Cells;背景说明:NR8383(正常大鼠,1983年8月3日)来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞。细胞在gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了大约8-9个月。随后,不再需要外源生长因子。通过有限稀释法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞,并三次用软琼脂亚克隆。细胞表现出巨噬细胞的特性,吞噬酵母多糖和铜绿,非特异性脂酶活性,Fc受体,氧化降解;分泌IL-1,TNFbeta和IL-6,可重复地响应外源生长因子。NR8383细胞响应博莱霉素,分泌TGFbeta前体。在博莱霉素刺激下,TGFbe;传代方法:1:2传代;生长特性:半贴壁生长;形态特性:巨噬细胞;相关产品有:SU4细胞、NK92细胞、HFL 1细胞
GM23337 Cells(提供STR鉴定图谱)
THLE-2 Cells人肝细胞复苏中心|有STR图谱
LN-229-Luc Cells人胶质瘤细胞复苏中心|有STR图谱
H9c2(2-1) Cells大鼠心肌细胞复苏中心|有STR图谱
CC-LP-1 Cells人胆管癌细胞复苏中心|有STR图谱
SW480 Cells人结肠腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
HAP1 MSN (-) Cells(提供STR鉴定图谱)
OVCA 432 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:YES2细胞、NT-2细胞、HOC细胞
H661 Cells;背景说明:该细胞1982年建系,源自一位患有大细胞肺癌的男性的胸腔积液。该细胞角蛋白、波形蛋白阳性。;传代方法:1:3—1:5传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:ABC1细胞、BHK21细胞、TSUpr1细胞
MPC 11 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞
G-292 clone A141B1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:EB2细胞、NCIH244细胞、LLC1细胞
HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱
A2780-GFP Cells人卵巢癌细胞复苏中心|有STR图谱
JM-1 Cells人B淋巴母细胞瘤细胞复苏中心|有STR图谱
PIEC Cells猪髋动脉内皮细胞复苏中心|有STR图谱
IGROV-1 Cells人卵巢癌细胞复苏中心|有STR图谱
CFPAC-1-Luc Cells人胰腺导管癌细胞复苏中心|有STR图谱
COLO 205-Luc Cells人结肠癌细胞复苏中心|有STR图谱
NIH/3T3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
BC-024 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MGH-UI细胞、SUM 159细胞、MV-1-Lu细胞
MG63 Cells;背景说明:该细胞源自14岁患有骨肉瘤的白人男性;聚次黄嘌呤核苷-聚胞嘧啶核苷酸、和D可以诱导产生高水平的干扰素。该细胞表达TGF-β受体Ⅰ和Ⅱ。 ;传代方法:1:4-1:8传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:SW 1271细胞、VP 229细胞、SW 13细胞
H1417 Cells;背景说明:小细胞肺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Jiyoye细胞、GM03671C细胞、GM2131细胞
HQ00784 Cells(提供STR鉴定图谱)
KE #1 Cells(提供STR鉴定图谱)
NCI-H292 Cells人肺癌细胞复苏中心|有STR图谱
HCC-LM3 Cells人高转移性肝癌细胞复苏中心|有STR图谱
NCI-H146 Cells人小细胞肺癌细胞复苏中心|有STR图谱
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma] Cells人弥漫大B淋巴瘤细胞复苏中心|有STR图谱
OVCAR-8 Cells人卵巢癌腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
EA.hy 926-GFP Cells人脐静脉融合细胞复苏中心|有STR图谱
SK-N-SH Cells人神经母细胞瘤细胞复苏中心|有STR图谱
MHHi001-A-7 Cells(提供STR鉴定图谱)
NLGIP-1103 Cells(提供STR鉴定图谱)
RBL-2H3 ADORA2A Gq Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene A-549 PIK3R3 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
UT48 Cells(提供STR鉴定图谱)
Schneider 2 Cells果蝇胚胎细胞复苏中心|有STR图谱
SNU-398 Cells人肝癌细胞复苏中心|有STR图谱
Y3-Ag 1.2.3 Cells大鼠骨髓瘤细胞复苏中心|有STR图谱
G-402 Cells人肾平滑肌瘤细胞复苏中心|有STR图谱
B16-Luc Cells小鼠黑色素瘤细胞复苏中心|有STR图谱
H22-Luc Cells小鼠肝癌细胞复苏中心|有STR图谱
HAP1 TRIM72 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
NCIH1694 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:3-4天换液1次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:聚团悬浮;相关产品有:GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
BxPC-3 Cells;背景说明:这个细胞株不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子(CFTR)。CFTR阳性的细胞株是Capan-1(ATCCHTB-79)。;传代方法:消化5-10分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:RPMI-7666细胞、M 1细胞、H-345细胞
SKES1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:5传代;每周换液2-3次;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:上皮样;相关产品有:Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞
NCTC 1469 Cells小鼠正常肝细胞复苏中心|有STR图谱
J82 Cells人膀胱移行细胞癌细胞复苏中心|有STR图谱
Calu-1 Cells人肺癌细胞复苏中心|有STR图谱
DLM8 Cells小鼠骨肉瘤细胞复苏中心|有STR图谱
293-EBNA1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:10传代;每周2次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:NS-1-Ag4-1细胞、RAW264.7细胞、Blotchy fibroblast-11细胞
Vero 76 clone E-6 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
Vero 76 clone E-6 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
HEK293-F Cells人胚肾细胞复苏中心|有STR图谱
HCT116+GFP Cells人结肠癌细胞复苏中心|有STR图谱
HK-2 [Human kidney] Cells人肾小管上皮细胞低代次复苏|STR图谱
A-673 Cells人横纹肌肉瘤细胞复苏中心|有STR图谱
SKOV3/LUC KO sik2 Cells人卵巢癌细胞复苏中心|有STR图谱
SK-MEL-5 Cells人皮肤黑色素瘤细胞复苏中心|有STR图谱
Panc 2.03 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:CC-LP-1细胞、SNU-368细胞、SKML-28细胞
ME16C Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞
H1688 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:T/G HA VSMC细胞、KLM1细胞、HEL-299细胞
VM Cub 1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:INS1E细胞、HLEpiC细胞、22Rv1细胞
Vero 76 clone E-6 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
Vertebral Cancer of the Prostate Cells;背景说明:1997从一位不受激素影响的前列腺癌患者脊椎转移灶中建立了这株细胞。先在小鼠中进行异种移植传代,随后进行体外培养。体内及体外都对雄性激素敏感。;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:CT26.WT细胞、JTC-39细胞、MMVECs细胞
M059J Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:6-1:8传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:Reuber-H-35 hepatoma细胞、RPE D407细胞、CFSC-8B细胞
"