HK-2 [Human kidney] Cells(赠送Str鉴定报告)|人肾小管上皮细胞

"HK-2 [Human kidney] Cells(赠送Str鉴定报告)|人肾小管上皮细胞

细胞背景资料：该细胞属源于正常肾的近曲小管细胞，通过导入HPV-１６ E６/E７基因而获得永生化。将含有HPV-１６ E６/E７基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN １６ E６/E７转染外生包装细胞Psi-２，Psi-２细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA３１７，最后将PA３１７产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN １６ E６/E７中含有新霉素抗性，但未用G４１８筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示HK-２细胞来源于单克隆。PCR检测证实HK-２细胞基因组中含有E６/E７基因。

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

MCF-7/AdrR细胞类似产品：：RPMI no 8226细胞、NCIH28细胞、HBE135-E6E7细胞

NCTC-1469细胞类似产品：：COLO-357细胞、Jeko1细胞、FRhK4细胞

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SKNF1细胞类似产品：：HAC-84细胞、SNU638细胞、AtT-20细胞

ACC3细胞类似产品：：SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：４传代；２-３天换液１次

H1694细胞类似产品：：beta TC6细胞、TE671细胞、CCRF/CEM/0细胞

TALL 1细胞类似产品：：Michigan Cancer Foundation-12F细胞、SW837细胞、MPC-5细胞

INS-1E细胞类似产品：：AA-Mel细胞、Ramos (RA)细胞、PL-45细胞

JROECL19细胞类似产品：：LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞

VP229细胞类似产品：：SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

HK-2 [Human kidney] Cells(赠送Str鉴定报告)|人肾小管上皮细胞

细胞生长特性：贴壁生长

WM266细胞类似产品：：KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞

MPC-5细胞类似产品：：NCI-SNU-886细胞、NCIH1703细胞、MOLM-14细胞

SK-MEL-3细胞类似产品：：HBZY-1细胞、GM07404D细胞、Strain L-929细胞

HaCaT细胞类似产品：：HO-1-N-1细胞、Be Wo细胞、MGSMC细胞

NCI-H1666细胞类似产品：：Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞

OCI-AML2细胞类似产品：：COLO320DM细胞、Panc02.03细胞、HNE1细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存Zui常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增GAO，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提GAO细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。

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HCC1359细胞类似产品：：SU-DHL2细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞、LL/2 (LLC1)细胞

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Bac12F5细胞类似产品：：RERF-LCMS细胞、WEHI 164细胞、H-28细胞

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SUM-149PT细胞类似产品：：AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞

IMR 32细胞类似产品：：RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞

16HBE14o-细胞类似产品：：Panc 3.27细胞、SGC7901细胞、HeLa/S3细胞

HREC细胞类似产品：：H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞

PANC-03-27细胞类似产品：：hTERT-HME-1细胞、G 401细胞、HEK.EBNA细胞

E.L.4细胞类似产品：：HEL9217细胞、HEL299细胞、SVHUC细胞

TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞类似产品：：NCI-1155细胞、H-2052细胞、Panc05.04细胞

PANC403细胞类似产品：：MFM223细胞、Hs294T细胞、H-929细胞

697细胞类似产品：：NUGC3细胞、CCD 841 CoN细胞、NCI-H841细胞

HANK-1细胞类似产品：：HPAF-II/CD18细胞、Hs274T细胞、NCI-H1618细胞

SW 948细胞类似产品：：MGc80-3细胞、Hs 766.T细胞、P31FUJ细胞

Hs863T细胞类似产品：：NCIH1836细胞、NIH:OVCAR-5细胞、NCIH1048细胞

MHCC97-L细胞类似产品：：SKCO1细胞、RKO细胞、KNS-62细胞

3-LL细胞类似产品：：H-1568细胞、RPMI2650细胞、SGC7901细胞

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