谷胱甘肽S-转移酶（GST）检测试剂盒（分光光度法50T/48S）

谷胱甘肽 S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）试剂盒说明书 

分光光度法 50 管/48 样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义： 

GST 是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，主要存在于细胞质内。GST 是体内解毒酶系统的重要组 成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与 GSH 的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易 于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此，GST 在保 护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外，因为 GST 具有 GSH-Px 活性，亦称为 non-Se GSH-Px，具有修复氧化破坏的大分子如 DNA、蛋白质等的功能。

注意，GST 催化的反应减少 GSH 含量，但是不增加 GSSG 含量。 

测定原理： 

GST 催化 GSH 与 CDNB 结合，其结合产物的光吸收峰波长为 340nm；通过测定 340nm 波长处吸光度 上升速率，即可计算出 GST 活性。自备

仪器和用品： 

紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1ml 石英比色皿和蒸馏水。

粗酶液提取：

1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂 一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10 4个）：试剂一体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加 入 1ml 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 8000g， 4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。3. 血清等液体：直接测定。 

测定操作： 

1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 340 nm，用蒸馏水调零。 

2. 试剂三放在 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）保温。 3. 测定管：取 1ml 石英比色皿，加入 100μl 上清液，900μl 试剂二和 100μl 试剂三，迅速混匀后于 340nm 测定吸光度变化，记录 10 s 和 310 s 吸光度为 A1 和 A2。