HL60 Clone 15人白血病细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:白人女性，36岁

组织来源:外周血

生长特性:悬浮生长

细胞形态:淋巴母细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

来源与病理特征

组织来源：源自人急性早幼粒细胞白血病（APL）患者外周血，经亚克隆筛选获得 Clone 15亚系，保留HL-60母系的典型特征。

分子特征：

遗传背景：PML-RARA融合基因阴性（区别于NB4细胞系），MYC基因高表达。

分化潜能：可被诱导分化为粒细胞样（DMSO/ATRA）或单核细胞样（PMA）形态。

培养特性：

悬浮生长，细胞呈球形，聚集成松散团块，增殖速度快（倍增时间约20-24小时）。

需定期换液（每2-3天）避免代谢废物堆积。

临床相关性

白血病分化治疗研究的经典模型，适用于 表观遗传调控（如HDAC抑制剂）及 化疗耐药机制 探索。

2. 核心科研应用

转化医学研究

分化治疗：

测试ATRA（全反式维甲酸）或维生素D3诱导分化效率（通过CD11b/CD14流式检测）。

研究DNA甲基化抑制剂（如5-氮杂胞苷）对分化阻滞的逆转作用。

药物筛选：

评估拓扑异构酶抑制剂（如依托泊苷）或蒽环类药物（如阿霉素）的敏感性。

类器官共培养模拟骨髓微环境（如与HS-5基质细胞共育）。

分子机制

信号通路：通过CRISPR敲除MYC基因，研究其对细胞周期的影响。

代谢重编程：分析糖酵解与氧化磷酸化平衡在分化中的作用（Seahorse检测）。

3. 培养与质控标准

标准化操作

培养基：RPMI-1640 + 20% FBS + 1% GlutaMAX（支持高增殖需求）。

传代要点：

轻柔离心（300g, 5分钟），重悬时避免气泡，传代比例1:3至1:5。

维持密度在2×10?–1×10? cells/mL（过低密度导致生长停滞）。

冻存：冻存液含10% DMSO + 90% FBS，程序降温后液氮保存。

质控节点

分子验证：

季度检测MYC表达（qPCR）及STR分型（比对DSMZ ACC-3）。

功能检测：

DMSO诱导分化后CD11b阳性率＞70%（流式验证）

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