HCC1954人乳腺癌细胞

HCC1954人乳腺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:61 岁，女性

组织来源:乳腺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI-1640 Medium+10%fetal bovine serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

溯源与分子特征：

组织来源：源自人乳腺浸润性导管癌，明确为 HER2阳性（HER2+）乳腺癌（IHC 3+或FISH确认扩增），同时具有 PIK3CA激活突变（H1047R常见），属高侵袭性亚型。

分子标签：

关键驱动变异：

HER2/neu（ERBB2）基因扩增（拷贝数＞10）。

PIK3CA突变（80%病例）与PTEN缺失（双重PI3K通路激活）。

标志物表达：HER2+、EGFR+（部分亚群），ER/PR阴性（三阴性与HER2+的混合特征需注意）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈多边形或梭形，接触抑制丧失，易形成多层克隆。

增殖速度快（倍增时间约24-30小时），需频繁传代（2-3天）。

临床相关性

HER2靶向治疗耐药研究的黄金模型，尤其适用于 双重通路抑制（HER2+PI3K） 策略开发。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

靶向治疗：

测试第二代HER2抑制剂（如来那替尼）联合PI3K抑制剂（如阿培利司）的协同效应。

研究抗HER2抗体耐药机制（如HER2截短突变p95-HER2或IGF-1R激活）。

免疫治疗：

评估HER2-CAR-T细胞或双特异性抗体（如KN026）的疗效。

类器官模型研究肿瘤微环境（如CAFs分泌的HGF介导耐药）。

疾病模型

PDX模型：NSG小鼠乳腺脂肪垫原位接种，保留HER2/PIK3CA共突变特征。

脑转移研究：颅内注射模拟血脑屏障穿透（需验证HER2+乳腺癌脑转移倾向）。

3. 标准化操作体系：

培养方案

培养基：DMEM高糖 + 10% FBS + 4 mM GlutaMAX + 1% NEAA（支持高代谢需求）。

传代要点：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），轻柔吹打避免HER2蛋白剪切。

接种密度：1.5×10? cells/cm2（低密度维持增殖活力）。

冻存：程序降温冻存液（90% FBS + 10% DMSO），液氮长期保存。

质控节点

分子验证：

季度检测HER2扩增（FISH）及PIK3CA突变（数字PCR），STR分型比对ATCC CRL-2338。

功能检测：

曲妥珠单抗敏感性测试（IC??≤20 μg/mL为敏感阈值）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。