GP2d人结肠癌细胞

GP2d人结肠癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:女性，71岁

组织来源:结肠

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM + 2mM Glutamine + 10% Foetal Bovine Serum (FBS)37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代，2-3天传1代

来源与病理特征：

组织来源：源自人结肠腺癌组织，病理亚型需验证（文献提示可能为 微卫星稳定型（MSS），与APC/TP53/KRAS突变相关）。

分子特征：

高频突变：APC（＞90%）、TP53（50-70%）、KRAS G12D/V（40%），需验证PIK3CA突变状态。

标志物表达：CK20+、CDX2+（肠上皮分化），PD-L1低表达（免疫治疗响应可能有限）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈多边形或梭形，接触抑制丧失，易形成多层克隆。

增殖速度中等（倍增时间约30-40小时）。

临床相关性

适用于 经典Wnt信号通路异常 及 KRAS靶向治疗耐药 机制研究。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

靶向治疗：

测试KRAS G12C抑制剂（如索托拉西布）的敏感性及耐药机制（如MET扩增）。

联合策略：EGFR抑制剂（西妥昔单抗）+ MEK抑制剂（曲美替尼）在KRAS突变背景下的效果。

转移机制：

脾脏注射建立肝转移模型（4-6周），研究CXCR4/CXCL12轴作用。

类器官培养模拟肿瘤微环境异质性。

分子机制

Wnt/β-catenin通路：通过CRISPR敲除APC，研究通路异常对干性维持的影响。

代谢重编程：分析谷氨酰胺代谢依赖性与化疗抵抗的关系。

3. 培养与质控标准：

标准化操作

培养基：DMEM高糖 + 10% FBS + 1% NEAA + 10 mM HEPES（pH稳定性）。

传代要点：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），镜下观察细胞回缩后终止。

接种密度：1×10? cells/cm2（避免低密度停滞）。

冻存：程序降温冻存液（90% FBS + 10% DMSO），复苏存活率＞85%。

质控节点

分子验证：

季度检测KRAS突变（ARMS-PCR）及STR分型（比对JCRB/ATCC数据库）。

功能检测：

软琼脂克隆形成实验（评估恶性转化程度）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。