"GP2d:人结肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
UM-UC14细胞类似产品::NCIH510细胞、OVCAR 8细胞、Psi2-DAP细胞
GM02219D细胞类似产品::RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
KYSE180细胞类似产品::RSC-96细胞、SU4细胞、JROECL21细胞
BT474细胞类似产品::H-727细胞、McA-RH8994细胞、MS-751细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
GP2d:人结肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
MV4-11细胞类似产品::EBTr (NBL-4)细胞、AC16 [Human hybrid]细胞、SKLU01细胞
HCGC细胞类似产品::BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
578T细胞类似产品::ME1细胞、MES 23.5细胞、HT 29细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2—1:3传代,每周换液2—3次
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
GP2d:人结肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过GAO时,易造成培养基中细胞碎片增多,黑渣子增多,常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化,对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化,细胞密度过GAO超过80%时,采用分步消化法。胰酶储存在-20°C,解冻在4°C进行,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于-20°C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤:消化过度细胞碎片增多,黑渣子增多,细胞会成片脱落,严重影响细胞活性,并有部分细胞漂浮,随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下,反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同,胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度,是否含EDTA,胰酶的储存时间,胰酶的储存温度,是否反复冻融,消化加入的胰酶体积,消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞,建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间,可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆,记录Zui佳消化时间,下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
JJN-3细胞类似产品::HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
RCC10细胞类似产品::LAPC4细胞、H2108细胞、P116细胞
ROS1728细胞类似产品::T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞
DR2R1610细胞类似产品::253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞
EFM-19细胞类似产品::SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
HCO细胞类似产品::SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
Hs 737.T细胞类似产品::293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞
343 MG细胞类似产品::SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞
UWB1289细胞类似产品::A 2780 CP细胞、Panc_05_04细胞、NCIH2081细胞
U-87MG细胞类似产品::D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
CCD841CoTr细胞类似产品::A-72细胞、MFM223细胞、U-343细胞
RIN m5F细胞类似产品::H-2141细胞、ROS-17/2.8细胞、SF 295细胞
H1238细胞类似产品::Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、PC-3M-IE8细胞、A549-Taxol细胞
C3H10T1-2细胞类似产品::V79-1细胞、BT 325细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞
JIMT-1细胞类似产品::TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
NCIH1435细胞类似产品::CHG-5细胞、293-GP细胞、JIII细胞
NCIH1435细胞类似产品::CHG-5细胞、293-GP细胞、JIII细胞
SNU-484细胞类似产品::T.T细胞、KTC-1细胞、EBNA293细胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞类似产品::451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞
Neukoplast细胞类似产品::HKF细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、TOV21G细胞
A204细胞类似产品::HuT 102细胞、KY-270细胞、TK10细胞
HCT.116细胞类似产品::SO-Rb 50细胞、P3-X63-Ag8-653细胞、SHSY-5Y细胞
N-2a细胞类似产品::SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞
GC-2spd(ts)细胞类似产品::Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
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NCIH1648细胞类似产品::NRK-49F细胞、Hs343T细胞、NS-1细胞
SKNDZ细胞类似产品::751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞
RASMC细胞类似产品::OCI-Ly8细胞、TPC-1细胞、WSU-DLCL-2细胞
HS-695T细胞类似产品::HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞
H-1693细胞类似产品::3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
NCIH847细胞类似产品::SUPM2细胞、Pa16C细胞、H23细胞
HEK AD293细胞类似产品::P3-X63.Ag8.653细胞、C918细胞、SF-767细胞
WM-266-4细胞类似产品::CCD-966SK细胞、T-HSC细胞、MCF-7/ADR-RES细胞
SNU-C2A细胞类似产品::AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
TNC-1B12B4细胞类似产品::Pa18C细胞、G-402细胞、U373MG细胞
LA4细胞类似产品::293/EBNA-1细胞、NS1细胞、T HEECs细胞
EB2细胞类似产品::CX1细胞、786O细胞、NCIH524细胞
A549/ATCC细胞类似产品::DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞
WM 451-Lu细胞类似产品::HCC2185细胞、H-716细胞、MKN 45细胞
SDBMSC细胞类似产品::hSCC-25细胞、HSAS4细胞、VMM39细胞
PC-3M-1E8细胞类似产品::OVCAR-4细胞、ARH 77细胞、QBI-293A细胞
Epstein-Barr-1细胞类似产品::HIT T-15细胞、HCC1359细胞、MDCC-MSB-1细胞
H1975细胞类似产品::GM0637细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞
MN-9D细胞类似产品::Mono Mac6细胞、BT549细胞、H-2405细胞
NBL-2细胞类似产品::NPC-039细胞、Farage Original Line细胞、EFM192B细胞
TOV-21G细胞类似产品::H22-H8D8细胞、H865细胞、SNU-251细胞
UCLA-SO-14细胞类似产品::NCI-H650细胞、HDSMC细胞、H-711细胞
A 72细胞类似产品::AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞
T47D:A细胞类似产品::PL-45细胞、FLC7细胞、OACP4 C细胞
Be-Wo细胞类似产品::BC-022细胞、SIRC细胞、3T3(A31)细胞
NCI H548细胞类似产品::HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞
SF 539细胞类似产品::SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
NRK细胞类似产品::DC2.4细胞、Sp2/O-Ag14细胞、NCTC-3960细胞
A1847细胞类似产品::NCI-H345细胞、NCI-H647细胞、P-2003细胞
HDLM2细胞类似产品::HT-115细胞、HIC细胞、Duke University 4475细胞
MMVECs细胞类似产品::MFE 280细胞、MOLT16细胞、JIMT1细胞
OCI-Ly3细胞类似产品::C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
SJCRH30细胞类似产品::SBC-3细胞、RCC-10RGB细胞、NCI660细胞
H-1781细胞类似产品::RD-2细胞、CHG-5细胞、HSC4细胞
Institute for Medical Research-90细胞类似产品::CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
SK-ES-1细胞类似产品::CD18/HPAF细胞、CTLL2细胞、RKO细胞
TE-13细胞类似产品::Jurkat clone A3细胞、MT4细胞、SuDHL 1细胞
ROS1728细胞类似产品::T_T_细胞、TE-671细胞、MDA2B细胞
HEK293-A细胞类似产品::UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞
SUIT-2细胞类似产品::K1735细胞、GalK 1细胞、HLCL9B10细胞
H-125细胞类似产品::U937细胞、MV4II细胞、P388细胞
B16 melanoma细胞类似产品::As-PC1细胞、End1/E6E7细胞、H889细胞
LP-1细胞类似产品::KYSE520细胞、Colon26细胞、HIBEC细胞
NCI H716细胞类似产品::OCI-Ly10细胞、NW-38细胞、SW 1990细胞
H2066细胞类似产品::H889细胞、T-84细胞、PLA802细胞
HCT GEO细胞类似产品::ISHI细胞、Rainbow Trout Embryo细胞、T_T_细胞
L5178Y细胞类似产品::Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞
SW-1271细胞类似产品::HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
NCIH1623细胞类似产品::MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
Human Embryo Lung-1细胞类似产品::H-1437细胞、SKNBE(1)细胞、TKB-1细胞
SK.MEL.28细胞类似产品::H-1770细胞、U-251细胞、Z138细胞
RPMI 7951细胞类似产品::X63.Ag8.653细胞、BEAS 2B细胞、SU-DHL-4细胞
SUDHL10细胞类似产品::CV-1 in Origin Simian-7细胞、B16 BL6细胞、SW1271细胞
SL1细胞类似产品::Cates-1B细胞、NCI-H2347细胞、TFK1细胞
GL261细胞类似产品::GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞
NCI660细胞类似产品::87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
CEM细胞类似产品::Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
Nb2细胞类似产品::C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞
Nb2细胞类似产品::C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞
BHK-21细胞类似产品::QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞
L929(NCTC)细胞类似产品::C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞
DOK细胞类似产品::GM12878细胞、Nthy ori 3.1细胞、NB-19细胞
WERI Rb-1细胞类似产品::LY细胞、SW1116细胞、U-343 MG细胞
Panc02-H0细胞类似产品::PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
HOP 62细胞类似产品::SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞
SUNE-1细胞类似产品::D10G41细胞、SCC 15细胞、Hs822T细胞
SW48细胞类似产品::NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
H1563细胞类似产品::GM00346细胞、T98细胞、MT2细胞
LLC-PK1细胞类似产品::TR146细胞、RBE4细胞、A549/ATCC细胞
NCI-H1755细胞类似产品::BEAS2B细胞、Leukemia 1210细胞、LCLC103H细胞
UPCISCC154细胞类似产品::FTC133细胞、SK-N-BE(1)n细胞、138 MG细胞
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Mv.1.Lu细胞类似产品::YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞
HBZY1细胞类似产品::VeroE6细胞、Mac-1细胞、LS 174T细胞
LN-229细胞类似产品::RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
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RBL2H3细胞类似产品::b.End3细胞、NCTC 929细胞、NCI-SNU-449细胞
NCI-H920细胞类似产品::HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞
X63.Ag8.653细胞类似产品::NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
X63.Ag8.653细胞类似产品::NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
HEK293A细胞类似产品::NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞
B-104细胞类似产品::COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞
GP2d:人结肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
UMR 106细胞类似产品::SW 1990细胞、BSC1细胞、PC-3M-IE8细胞
OVHM细胞类似产品::MV-522细胞、NCIH1963细胞、H9c2(2-1)细胞
H2073细胞类似产品::253J B-V细胞、CSQT-2细胞、McA-RH8994细胞
373 MG细胞类似产品::OEC19细胞、MAVER1细胞、NCIH295R细胞
Hs 766.T细胞类似产品::NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞
CV-1.K细胞类似产品::OVMANA细胞、Ku812F细胞、RH8994细胞
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