G361 人黑色素瘤细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:McCoy's 5a Medium Modified+10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

溯源与分子特征

组织来源：源自人皮肤转移性黑色素瘤，属 BRAF V600E突变阳性 模型（占黑色素瘤50%以上），具有典型侵袭性特征。

分子标签：

驱动突变：BRAF V600E（组成性激活MAPK通路），常伴PTEN缺失（PI3K/AKT通路激活）。

标志物表达：S100+、HMB-45+（黑色素细胞标志），PD-L1可变表达（与免疫治疗相关）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈梭形或星形，胞质内可见黑色素颗粒（需定期传代避免过度沉积）。

增殖速度快（倍增时间约24-30小时）。

临床相关性

靶向治疗耐药研究的关键模型，尤其适用于BRAF抑制剂（如维莫非尼）与MEK抑制剂（如考比替尼）联用策略的机制探索。

2. 核心科研应用

转化医学研究

靶向治疗：

研究BRAF抑制剂耐药机制（如NRAS突变、COX-2过表达）。

评估免疫治疗（PD-1抗体）与靶向药的协同效应（需检测IFN-γ信号）。

转移机制：

尾静脉注射构建肺转移模型（4-6周），分析CXCR3/CXCL10轴的作用。

3D胶原基质培养模拟微环境侵袭。

临床前模型

PDX模型：保留原发肿瘤分子特征，用于个体化药物筛选。

类器官：与成纤维细胞共培养研究基质依赖的耐药性。

3. 标准化操作体系

培养方案

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% NEAA + 10 mM HEPES（pH缓冲）。

传代要点：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），镜下观察细胞回缩后终止。

接种密度：2×10? cells/cm2（低密度易导致分化异常）。

黑色素清除：0.1% EDTA预处理5分钟（减少颗粒干扰实验）。

质控节点

分子验证：

季度检测BRAF V600E突变（ARMS-PCR）及STR分型（比对ATCC CRL-1424）。

功能检测：

软琼脂克隆形成实验（评估恶性转化程度）。

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