"G-361:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升GAO，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
UMUC14细胞类似产品：：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞
GM05887A细胞类似产品：：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞
B16/F1细胞类似产品：：H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞
SK N SH细胞类似产品：：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
G-361:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
HPAF2细胞类似产品：：EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
JB6 Cl 30-7b细胞类似产品：：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
HCC4006细胞类似产品：：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理HAO工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，Zui大的YOU点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
细胞传代方法：１：２-１：４传代，２-３天换液１次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
G-361:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁生长
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
DiFi细胞类似产品：：SUDHL10细胞、MLM细胞、8305C细胞
NK92MI细胞类似产品：：KYSE 450细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、Lu99A细胞
Lu-165细胞类似产品：：HEY A8细胞、HuO9细胞、HCC 70细胞
U-87 MG细胞类似产品：：LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
P3-X63-Ag8-653细胞类似产品：：H250细胞、JKT1细胞、SJSA细胞
SNU-739细胞类似产品：：A-498细胞、HGBEC细胞、AM-38细胞
PL-12细胞类似产品：：MOLT-3细胞、NCIH747细胞、NIE-115细胞
SNU-668细胞类似产品：：Mac-1细胞、EU-4细胞、NCI-H660细胞
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L-5178-Y细胞类似产品：：Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
Hs-600-T细胞类似产品：：H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞
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SKG3A细胞类似产品：：IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
NCI-H676B细胞类似产品：：J82细胞、CPAE细胞、A-427细胞
U118MG细胞类似产品：：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
Colo-678细胞类似产品：：SupB15WT细胞、Hela-mock细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞
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A7r5细胞类似产品：：SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞
PLC/PRF5细胞类似产品：：KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
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HS-294-T细胞类似产品：：HSAEC1-KT细胞、TC-1[JHU-1]细胞、TALL1细胞
MC38细胞类似产品：：QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞
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Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞类似产品：：SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞
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B-16细胞类似产品：：SU-86-86细胞、U-2 OS细胞、H1975细胞
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CL 1-5细胞类似产品：：PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞类似产品：：Hs 766细胞、WPE-int细胞、CCD966SK细胞
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KLN205细胞类似产品：：HeLa S 3细胞、ES-2细胞、H9c2 (2-1)细胞
SW-954细胞类似产品：：HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
SHEE细胞类似产品：：COLO320/DM细胞、SBC5细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞
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COLO 680N细胞类似产品：：SVG(P12)细胞、J45.01细胞、5637细胞
Ej138细胞类似产品：：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
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NCI-SNU-601细胞类似产品：：U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞
SACC-83细胞类似产品：：LM-TK-细胞、SGC996细胞、HCC-38细胞
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SW-954细胞类似产品：：HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
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U373-MG细胞类似产品：：Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞
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LU65细胞类似产品：：130 T细胞、H2405细胞、SW 1573细胞
U251细胞类似产品：：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、H-2444细胞、B16-F10-BL6细胞
OVCA 433细胞类似产品：：Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞
G-361:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
KMST-6细胞类似产品：：DF-1细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、NCIH441细胞
EAhy926细胞类似产品：：Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
MH7A细胞类似产品：：HOK细胞、BHP-10细胞、H1793细胞
NOR-10细胞类似产品：：ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞
MILE SVEN 1细胞类似产品：：AN3 CA细胞、Ha Fe细胞、GM04154细胞
H1435细胞类似产品：：Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞
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