EBC1人非小细胞肺癌细胞

EBC1人非小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:69 岁，日本男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:MEM + 10% FBS+ 1% NEAA + 1mM Sodium Pyruvate (NaP)

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

溯源与分子特征：

组织来源：源自人非小细胞肺癌（NSCLC）组织，病理亚型需验证（文献多提示为 肺鳞癌），属高侵袭性模型。

分子标签：

驱动基因：MET exon14跳跃突变阳性（特征性变异，可通过RT-PCR验证），TP53常见伴随突变。

标志物表达：p40+（鳞状分化标志），PD-L1表达需检测（与免疫治疗相关）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈多边形或梭形，接触抑制弱，易形成多层克隆。

增殖速度中等（倍增时间约30-36小时）。

临床相关性

MET exon14跳跃突变是NSCLC靶向治疗的重要靶点（对应药物：克唑替尼、卡马替尼）。

2. 核心科研价值：

转化医学研究

MET靶向治疗：

测试MET-TKI（如特泊替尼）敏感性及耐药机制（如MET D1228N二次突变）。

联合策略：MET抑制剂+免疫检查点抑制剂（PD-1抗体）的协同效应评估。

转移机制：

研究HGF/MET通路激活对EMT（上皮-间质转化）的调控作用。

尾静脉注射建立肺/肝转移模型，分析MET信号对转移生态位的塑造。

临床前模型

PDX模型：保留原发肿瘤的MET突变特征，用于个体化药物筛选。

3D类器官：模拟肿瘤微环境，测试药物渗透性。

3. 标准化操作体系：

培养方案

培养基：DMEM高糖 + 10% FBS + 1% NEAA + 10mM HEPES（pH稳定性）。

传代规范：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），镜下观察细胞回缩后终止。

接种密度：2×10? cells/cm2（避免低密度停滞）。

冻存：程序降温冻存液（FBS:DMSO=9:1），复苏存活率>90%。

质控节点

分子验证：

季度检测MET exon14突变（ddPCR）及STR分型（比对JCRB数据库）。

功能检测：

体外侵袭实验（Transwell预铺Matrigel）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。