DiBAC4(3) 膜电位荧光探针的具体介绍

一、产品描述

慢反应探针（Slow-response probes），包括阳离子羰花青、罗丹明和阴离子氧鎓醇（Oxonols），都用来检测不可兴奋细胞因呼吸活性、离子通道渗透和其他因素引起的平均膜电位变化。

DiBAC4(3) (Bis-(1,3-Dibutylbarbituric Acid)Trimethine Oxonol)，是一种慢反应的膜电位敏感探针，随着膜电位变化在细胞膜内进行重新分配。当染料由于膜的去极化进入细胞膜，荧光增强且往红色光谱迁移。

DiBAC4(3)对膜电位变化的荧光反应速率通常比苯乙烯染料（比如Di-4- ANEPPS）慢，但荧光信号变化较大（通常~1% fluorescence change/mV）。

DiBAC染料由于总负电荷被线粒体所排斥，使其在质膜电位测定上相较于羰花青染料表现较好。

DiBAC4(3)可用于流式实验中监测防御素的活性。

二、物理参数

【英文名称】：Bis(1,3-dibutylbarbituric acid) trimethine oxono（简称：DiBAC4(3））

【中文名称】：双(1,3-二巴比妥酸)-三次甲基氧烯洛尔

【CAS NO】：70363-83-6

【分子式】：C27H40N4O6

【分子量】：516.64 g/mol

【熔点】：>200℃

【沸点】：614.3±65.0 °C

【密度】：1.201±0.06 g/cm3

【酸度系数(pKa)】：4.80±0.20

【形态】：橙色固体

【Ex/Em】：493/516 nm

【溶解性】：溶于DMSO、DMF

【纯度】：≥95%

【储存条件】：-20℃避光干燥

三、生物活性

体外研究

用DiBAC4(3)清楚地观察到HEKBKα中10μM伊文思蓝(EB)诱导的膜超极化,而加入3mM四乙基氯化铵(TEA)的膜电位(MP)变化比用微电极测量的慢。通过微电极和DiBAC4(3)的测量,超极化峰值的时间分别为2.3±0.9 s(n = 4)和35.0±2.6 s(n = 12,P<0.01)。

细胞实验

在荧光测量之前，将细胞在含有100nM DiBAC4（3）的KRH（Krebs-Ringer-HEPES）缓冲液中在室温下孵育20分钟。染色的细胞无需洗涤即可用于实验。使用505nm双色镜和BA滤光器（> 520nm）收集荧光发射。

四、注意事项

实验调整：需根据细胞类型调整染料浓度和孵育时间，以减少对细胞的影响；

干扰因素：部分化合物可能干扰检测，实验时可选用缓冲液替代培养基。

安全避光：荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光；操作时请穿实验服并戴一次性手套。