吴茱萸次碱,84-26-4，萃园自制中药标准品对照品;实验科研级;≥98%以上 新品

芸香碱抑制血管紧张素 II 诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖。

目的： 评价芸香碱对血管紧张素 II （Ang II） 诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞 （VSMC） 增殖的影响和可能的机制。 方法： 为了检查芸香碱抗增殖作用所涉及的机制，测定了一氧化氮 （NO） 水平和 NO 合成酶 （NOS） 活性。实时逆转录-聚合酶链反应 （RT-PCR） 测定 VSMC 增殖相关基因的表达，包括内皮一氧化氮合酶 （eNOS） 和 c-myc 高血压相关基因-1 （HRG-1）。 结果： 芸香碱 （0.3-3.0 μmol/L） 抑制 Ang II 诱导的 VSMC 增殖，在 3.0 μmol/L 时效果最好。Rutaecarpine 拮抗 Ang II 诱导的细胞 NO 含量和 NOS 活性降低 （P <0.05）。Ang II 给药抑制 eNOS 和 HRG-1 的表达，同时增加 c-myc 的表达 （P <0.05）。3.0 μmol/L 芸香碱减轻了所有这些影响 （P <0.05）。 结论： 芸香碱对 Ang II 诱导的大鼠 VSMC 增殖有效，这种效果至少部分是由于 NO 的产生和 VMSC 增殖相关基因表达的调节。

生物碱芸香碱是小鼠和人肝微粒体中细胞色素 P450 1A 的选择性抑制剂。

芸香碱、吴茱萸碱和脱氢吴菖蒲碱是从传统中药 Evodia rutaecarpa 中分离的喹唑啉啉生物碱。使用小鼠和人肝微粒体研究了这些生物碱对细胞色素 P450 （P450） 催化的氧化的体外影响。
方法和结果：
在这些生物碱中，芸香平对 CYP1A 催化的 7-甲氧基试卤灵 O-脱甲基化 （MROD） 和 7-乙氧基试卤灵 O-脱乙基化 （EROD） 活性表现出最有效和选择性的抑制作用。EROD 与 MROD 的 IC（50） 比率为 6。对于 MROD 活性，Rutaecarpine 是一种非竞争性抑制剂，K（i） 值为 39 +/- 2 nM。相比之下，芸香碱对苯并[a]芘羟基化 （AHH） 、苯胺羟基化和硝苯地平氧化 （NFO） 活性没有影响。在人肝微粒体中，1 μM 芸香碱分别导致 EROD、MROD 和非那西丁 O-脱乙基化活性降低 98% 、 91% 和 77%。相比之下，在 1 μM 芸香平存在下观察到对 AHH、甲苯磺丁脲羟基化、氯唑沙宗羟化和 NFO 活性的抑制低于 15%。为了了解抑制 CYP1A1 和 CYP1A2 的选择性，使用 3-甲基胆蒽 （3-MC） 处理的小鼠的肝脏微粒体和表达双顺反子人 CYP1A1 和 CYP1A2 的大肠杆菌膜研究了芸香碱的抑制作用。与 CYP1A2 抑制剂呋喃碱类似，芸香碱优先抑制 MROD 而不是 EROD，并且对 3-MC 处理的小鼠肝微粒体中的 AHH 没有影响。对于双顺反子人 P450，芦芸香碱对 CYP1A1 的 EROD 活性的 IC（50） 值比 CYP1A2 高 15 倍。
结论：
这些结果表明，Rutaecarpine 是小鼠和人肝微粒体中 CYP1A2 的有效抑制剂。

芸香碱的血管舒张作用：对血管平滑肌和内皮细胞细胞内钙浓度的直接矛盾影响。

我们已经检查了低血压作用和细胞内 Ca++ 调节的机制，这是芸香碱 （Rut） 诱导的血管舒张的基础。静脉注射 在麻醉的 Sprague-Dawley 大鼠中推注 Rut 产生了剂量依赖性降压作用。
方法和结果：
在离体大鼠主动脉环中，Rut （0.1-3 μ M） 分别抑制去甲肾上腺素和叶肾上腺素诱导的收缩的阶段和强直反应，主要通过内皮依赖性机制。然而，Rut （3 μM） 的血管舒张作用在裸露的主动脉中持续存在，尽管程度远小于完整组织。通过呋喃-2/AM（1-[2-（5-羧基噁唑-2-基）-6-氨基苯并呋喃-5-氧]-2-（2'-氨基-5'-甲基苯氧基）-乙烷-N，N，N，N-四乙酸五乙酰氧基甲酯）方法测定，Rut （10 μM），在细胞外 Ca++存在下，抑制 KCI 诱导的培养血管平滑肌细胞 （VSMC） 细胞内 Ca++ 浓度 （[Ca++]i） 的增加。Rut （10 μM） 还减弱了去甲肾上腺素诱导的 VSMC 中 [Ca++]i 的峰值上升，置于无 Ca++ 的溶液中。另一方面，在细胞外 Ca++ 存在下，Rut （1 和 10 μM） 增加了培养的内皮细胞 （EC） 的 [Ca++]i 水平。
结论：
总之，Rut 直接作用于 VSMC 和 EC。在 VSMC 中，它通过抑制 Ca++ 内流和 Ca++ 从细胞内储存中释放来减少 [Ca++]i。在 EC 中，Rut 通过增加 Ca++ 内流来增强 EC [Ca++]i，可能导致一氧化氮释放。VSMC 和 EC 中 Ca++ 的反常调节同时起作用导致血管舒张，这可能至少部分解释低血压作用。这是本研究最重要和独特的特点。

降钙素基因相关肽介导的芦香碱对自发性高血压大鼠的降压和抗血小板作用。

我们之前已经报道过，中药 Rutaecarpine （Rut） 在苯酚诱导的双肾、单夹高血压大鼠中产生了持续的降压作用。本研究的目的是确定 Rut 是否可以对自发性高血压大鼠 （SHR） 发挥抗高血压和抗血小板作用及其潜在机制。
方法和结果：
在体内，给予 SHR Rut，监测血压。采集血液用于测量降钙素基因相关肽 （CGRP） 、组织因子 （TF） 浓度和活性以及血小板聚集，并保存背根神经节用于检测 CGRP 表达。在体外，测量了 Rut 和 CGRP 对血小板聚集的影响，并测定了 CGRP 对血小板衍生的 TF 释放的影响。Rut 在 SHR 中发挥持续的降压作用，同时增加 CGRP 的合成和释放。Rut 处理还显示出对血小板聚集的抑制作用，伴随着血浆中 TF 活性和 TF 抗原水平的降低。体外研究表明，在胸主动脉存在下，Rut 对血小板聚集有抑制作用，其被辣椒西平或香草素受体或 CGRP 受体的拮抗剂 CGRP （8-37） 消除。外源性 CGRP 能够抑制血小板聚集和血小板衍生的 TF 的释放，这些被 CGRP 消除 （8-37）。
结论：
结果表明，Rut 通过刺激 SHR 中 CGRP 的合成和释放同时发挥抗高血压和抗血小板作用，CGRP 介导的抗血小板作用与抑制血小板衍生的 TF 的释放有关。

芸香碱对雌性 BALB/c 小鼠的免疫抑制作用。

芸香碱是从 Evodia rutaecarpa 中分离的主要喹唑啉生物碱。据报道，它具有广泛的药理活性，例如血管舒张、抗血栓形成和抗炎。
方法和结果：
在本研究中，确定了 Rutaecarpine 对雌性 BALB/c 小鼠免疫功能的不利影响。通过转氨酶的血清活性测量，芸香碱对小鼠的肝毒性参数没有影响。同时，当小鼠静脉注射 10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg 或 80 cmg/kg 时，芸香碱显着降低抗体形成细胞的数量，并以剂量依赖性方式导致脾脏重量减轻。此外，服用 Rutaecarpine 的小鼠表现出脾细胞数量减少，脾脏中总 T 细胞、CD4 （+） 细胞、CD8 （+） 细胞和 B 细胞数量减少。Rutaecarpine 处理显著抑制了 IL-2 、 干扰素-γ 和 IL-10 mRNA 的表达。小鼠服用芸香碱后 CD4 （+） IL-2 （+） 细胞的数量显着减少。此外，Rutaecarpine 以剂量依赖性方式导致细胞周期停滞在 G（0）+G（1） 期。芸香碱剂量依赖性地引起肝细胞色素 P450 （CYP） 1A、2B 和 2E1 活性的显著诱导。在脾淋巴细胞增殖试验中，芸香碱通过离体 LPS 和 Con A 抑制增殖，而对体外增殖没有影响。
结论：
这些结果表明，单次推注静脉注射 20mg/kg 的芸香碱可能引起免疫抑制作用，并且芸香碱诱导的免疫抑制可能至少部分是通过抑制细胞因子产生和细胞周期停滞在 G（0）+G（1） 期介导的，并且可能是由与代谢激活相关的机制引起的。

一类新型 COX-2 抑制剂，来自 Evodia rutaecarpa 的芸香碱。

我们研究了一类新型 COX-2 抑制剂芸香碱对骨髓来源的肥大细胞 （BMMC） 中 PGD2 和 COX-2 转染的 HEK293 细胞中 PGE2 产生的影响。在雄性 Splague-Dawley （SD） 大鼠中由 lambda-卡拉胶诱导炎症。
方法和结果：
从芸香芸苓果实中分离出芸香碱 （8,13-二氢吲哚[2'，3'：3,4]吡啶[2,1-b]喹唑啉-5（7H）-one）。BMMC 用 WEHI-3 条件培养基培养。c-Kit 配体和 IL-10 是通过它们在杆状病毒中的表达获得的。 PGD2 和 PGE2 的产生由他们的检测试剂盒测定。在 KL 、 LPS 和 IL-10 存在下，通过 BMMC 测定 COX-1 和 COX-2 蛋白和 mRNA 表达。腹膜内给予溶于 0.1% 羧甲基纤维素中的芸香平和吲哚美辛，1 小时后，将 lambda-卡拉胶溶液注射到大鼠的右后爪。在 lambda-角叉菜胶注射后 5 小时使用体积描记器测量爪体积。芸香碱以浓度依赖性方式抑制 BMMC 中 PGD2 生成的 COX-2 和 COX-1 依赖期，IC50 分别为 0.28 μM 和 8.7 μM。它以剂量依赖性方式抑制 COX-2 转染的 HEK293 细胞以剂量依赖性方式抑制外源花生四烯酸向 PGE2 的转化。然而，芸香碱既不抑制 PLA2 和 COX-1 活性，也不抑制 COX-2 蛋白和 mRNA 的表达，在 BMMC 中浓度高达 30 μM，表明芸香碱直接抑制了 COX-2 活性。此外，Rutaecarpine 通过腹膜内给药对大鼠 lambda-carragenan 诱导的爪水肿显示出体内抗炎活性。
结论：
Evodia rutaecarpa 的抗炎活性至少部分归因于抑制 COS-2。

芸香碱对胰岛素抵抗原代骨骼肌细胞炎性细胞因子的影响。

现在已经确定，炎症在许多慢性代谢疾病的发展中起着重要作用，包括胰岛素抵抗 （IR） 和 2 型糖尿病 （T2DM）。骨骼肌负责胰岛素依赖性葡萄糖总摄取的 75%;因此，骨骼肌 IR 被认为是全身性 IR 发展的主要缺陷。 我们先前的研究表明，芸香碱 （Rut） 有益于 T2DM 大鼠的血脂分析，减轻炎症，并改善肾脏、肝脏、胰腺病理状况。然而，尚未研究 Rut 对 IR 骨骼肌细胞发育中炎性细胞因子的影响。因此，我们的目的是研究 Rut 对胰岛素抵抗原代骨骼肌细胞 （IR-PSMC） 中炎性细胞因子白细胞介体 （IL）-1 、 IL-6 和肿瘤坏死因子 （TNF）-α 的影响。
方法和结果：
从 5 例新生 SD 大鼠中制备骨骼肌细胞原代培养物，通过细胞形态鉴定原代大鼠骨骼肌细胞，通过 MTT 法鉴定茹铁芸香碱对细胞增殖的影响。棕榈酸 （PA） 诱导 IR-PSMC 细胞，葡萄糖氧化酶和过氧化物酶 （GOD-POD） 法测定葡萄糖浓度。采用酶联免疫吸附测定 （ELISA） 试剂盒检测 Rut 对 IR-PSMC 细胞炎性细胞因子 IL-1 、 IL-6 和 TNF-α 的影响。结果显示，新生大鼠原代骨骼肌细胞培养 2-4 d，平行排列规律，培养 7 d，细胞融合并形成肌管。结果表明，浓度为 0-180 的 Rut。0 μmol x L（-1） 对培养的原代骨骼肌细胞没有细胞毒性作用。然而，暴露于 0.6 mmol x L（-1） PA 24 小时后，原代骨骼肌细胞能够诱导胰岛素抵抗状态。获得的结果表明，与 Rut 孵育 24 小时时，培养的 IR-PSMC 细胞产生 IL-1 、 IL-6 和 TNF-α 显着减少 （P < 0.05 至 P < 0.001） 从 20 至 180.0 μmol x L（-1）。与 IR-PSMC 对照组相比，Rut 处理组的 IL-1 、 IL-6 和 TNF-α 呈剂量依赖性降低。
结论：
我们的结果表明，Rut 可能通过抑制 IR-PSMC 细胞中的炎性细胞因子促进葡萄糖消耗和改善胰岛素抵抗。

芸香碱对大鼠胃粘膜损伤的保护作用。

先前的研究表明，降钙素基因相关肽 （CGRP） 保护胃粘膜免受乙酰水杨酸 （ASA） 诱导的损伤，并且芸香碱激活香草素受体以诱发 CGRP 释放。
方法和结果：
在本研究中，我们检查了芸香碱对胃粘膜损伤的保护作用，并探讨了芸香碱的保护作用是否与通过激活大鼠香草素受体刺激内源性 CGRP 释放有关。在 ASA 诱导的溃疡模型中，测定胃粘膜溃疡指数、胃液 pH 值和血浆 CGRP 浓度。ASA 显著增加胃黏膜溃疡指数和 H+ 通过黏膜的反向扩散。剂量为 100 或 300 μg/kg （iv） 和 300 或 600 μg/kg （胃内，ig.） 的芸香碱降低了溃疡指数和 H+ 的反向扩散，这通过用辣椒素 （50 mg/kg， sc.） 或辣椒西平 （3 mg/kg， iv） 预处理而消除，一种竞争性香草素受体拮抗剂。Rutaecarpine 显着增加了 CGRP 的血浆浓度，这也被辣椒西平消除了。在应激诱导的溃疡模型中，芸香平减少了胃粘膜损伤，这被辣椒西平 （5 mg/kg， ip） 消除。
结论：
这些结果表明，芸香碱保护胃粘膜免受 ASA 和应激诱导的损伤，芸香碱的胃保护作用与通过激活香草素受体刺激内源性 CGRP 释放有关。