肉桂酸-4-羟化酶(C4H)测定试剂盒/分光光度法/48样 新品

肉桂酸-4-羟化酶(C4H)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

C4H  又称反式肉桂酸-4-单氧化酶，多存在于高等植物、酵母、菌类中，该酶催化肉桂酸羟化作用产生 4-香豆酸盐，是苯丙烷途径中继 L-苯丙氨酸解氨酶之后的第二个关键酶。

测定原理：

C4H  催化肉桂酸和 NADP   生成 4-香豆酸盐和 NADPH，在 340nm   下测定 NADPH   生成速率，即可反映

C4H  活性。

自备仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96  孔板、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：

1 、 分光光度计或酶标仪预热 30min   以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2 、 样本测定

（1）取试剂二一瓶，加入 10mL  试剂一充分溶解混匀，置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 5min；现配现用（配好后 24h   内用完）；

（2）在微量石英比色皿或 96  孔板中加入 10 μL  样本和 190 μL  试剂二，混匀，立即记录 340nm 处初始吸光值 A1  和 5min  后的吸光值 A2，计算 ΔA=A2-A1。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。