人乳腺癌细胞ER阴性

产品名称：人膀胱癌细胞RT112

人乳腺癌细胞ER阴性收到后处理

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）

人乳腺癌细胞ER阴性培养步骤

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃

人乳腺癌细胞ER阴性部分相关细胞如下：

YS1459 Kyse520 人食管鳞癌细胞Kyse520

YS1460 HS5 人骨髓基质细胞HS5

YS1461 HSC3 人口腔鳞状癌细胞HSC3

YS1462 MUTZ1 人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ1

YS1463 KYSE180 人食管鳞状细胞癌KYSE180

YS1464 SRA0104 人晶体上皮细胞SRA0104

YS1465 KYSE140 人食管鳞状细胞癌KYSE140

YS1466 WSUDLCL2 人弥漫大B淋巴瘤细胞WSUDLCL2

YS1467 RT112 人膀胱癌细胞RT112

YS1468 JIMT1 人乳腺癌细胞ER阴性（浸润性乳腺导管癌）JIMT1

YS1469 NUGC3 人胃癌细胞NUGC3

YS1470 MOLM13 人急性髓原白血病细胞MOLM13

YS1471 MeWo 人恶性黑色素瘤细胞MeWo

YS1472 NCIH1666 人肺支气管癌细胞/微浸润肺腺癌NCIH1666

YS1473 NCIH2122 人肺腺癌细胞NCIH2122

YS1474 NB4 人急性早幼粒白血病细胞NB4

YS1475 HEK293TACE2 人胚肾细胞稳转ACE2过表达HEK293TACE2

YS1476 RPMI2650 人鼻腔上癌细胞/头颈部鳞状细胞癌RPMI2650

YS1477 OCILY3 人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞OCILY3

YS1478 ExpiHEK293F 人胚肾细胞ExpiHEK293F

YS1479 NCIH522 人肺癌细胞NCIH522

YS1480 SNU16 人胃癌细胞SNU16

YS1481 FTC133 人甲状腺癌细胞FTC133

YS1482 GCIY 人胃癌细胞GCIY

YS1483 Hce8693 人盲肠腺癌细胞(未分化)Hce8693

YS1484 LC2AD 人肺癌腺癌细胞LC2AD

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