魏氏试剂 2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷—157843-41-9

2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷—157843-41-9

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中文：2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷

英文：CNP-AFU

CAS：157843-41-9

分子式：C6H4F2N2O2

纯度：≥90%

中文同义词：2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷

英文同义词：Fucosidase, a-L-NUCLEOSIDE PHOSPHORYLASE BACTERIAL;

技术指标

外观：无色透明液体；蛋白纯度：≥90%；比活性：≥5 U/mL；β-N-乙 酰葡糖胺糖苷酶：≤0.2%；α- 甘露糖苷酶：≤0.05%；β- 半乳糖苷酶：≤0.1%

酶学性质

来源：微生物；分类：EC 3.2.1.51；分子量：55 kDa(SDS-PAGE)；等电点：6.2；最适pH：7.5；最适温度：80℃；pH稳定性：7.0-10.0(25℃,16 h)；热稳定性：90℃ 以下稳定(pH 8.0,30 min)；稳定性：-25～-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性。

用途

用于岩藻糖苷酶等试剂校准、质控品的研发和大量配制。

酶活定义

单位酶活定义为在下述条件下，每分钟水解1μmol CNP-AFU所需的酶量。

试剂准备

试剂I：20mM pH 8.0 Tris-HCl。

试剂II：10mM CNP-AFU溶液（用 DMSO 溶解）。

酶稀释液：20mM pH 8.0 Tris-HCl。

操作步骤

1. 向 1mL 比色皿中加入 940μL 的试剂 I 和 50μL 试剂 II。

2. 将反应混合物在 37℃ 预热 5 min。

3. 加入 10μL 待测酶液，混匀。

4. 在  405nm  处测定  37℃ 反应，记录 1 min 内的吸光度变化（ΔAs）。

*用酶稀释液替代酶液，其它步骤相同，所得溶液吸光度为空白吸光度（ΔAb）ΔA=ΔAs-ΔAb