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人多能干细胞分化培养基AC-1001002

Human PSC Differentiation Medium
1782 1瓶 起订
上海 更新日期:2024-08-08

上海埃泽思生物科技有限公司

非会员
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产品详情:

中文名称:
人多能干细胞分化培养基
英文名称:
Human PSC Differentiation Medium
品牌:
埃泽思
产地:
上海
保存条件:
基础培养基 2-8℃,添加剂-20~-80℃;混匀后 2-8℃,2 周内使用完毕
产品类别:
ES/iPS细胞
货号:
AC-1001002
用途范围:
人多能干细胞诱导分化,拟胚体形成
规格:
490mL+10mL
是否进口:

人多能干细胞分化培养基

 

一、产品基本信息

 

产品名称

Applied Cell®人多能干细胞ES/iPS)分化培养基

AC-1001002

490mL+10mL

保存条件

基础培养基 2-8℃,添加剂-20~-80℃;混匀后 2-8℃,2 周内使用完毕。

使用范围

人多能干细胞诱导分化,拟胚体形成

保质期

12 个月

 二、产品简介

人多能干细胞分化培养基是埃泽思生物科技有限公司Applied Cell®研发的一款适用于人多能干细胞诱导分化的培养基。该培养基可用于 EB(拟胚体)的形成。拟胚体是人多能干细胞在悬浮培养条件下形成的球状结构,可用于细胞多能性检测,形成拟胚体可验证细胞分化潜能。

 

三、产品特性

诱导人多能干细胞(ES/iPS)形成拟胚体

 四、产品内容

 

试剂

规格

数量

运输

hPSC Differentiation Basal Medium 人多能干细胞分化-基础培养基

490mL

1 瓶

冰袋

hPSC Differentiation Supplement

人多能干细胞分化-添加剂

10mL

1 瓶

干冰


 

五、相关产品

Applied Cell®: Cat. no.AC-1001000) Advance 人多能干细胞培养基(Applied Cell®: Cat. no.AC-1001001) 人多能干细胞分化培养基Applied Cell®: Cat. no.AC-1001002)

人多能干细胞消化液(Applied Cell®: Cat. no.AC-1001008)

即用型基质胶Applied Cell®: Cat. no.AC-1001007)

 六、操作方法实验准备

1. 人多能干细胞分化培养基配制:

1.1.  2-8℃解冻人多能干细胞分化添加剂,轻晃摇匀;

1.2. 随后将添加剂加入到人类多能干细胞分化基础培养基中( 10mL 添加剂与 500mL 分化基础培养基彻底混合混匀即为人多能干细胞分化培养基(AC-1001002)。人多能干细胞分化培养基    可在 2-8℃稳定储存 2-3 周。

注意:人多能干细胞分化添加剂只能在 2-8℃解冻,可按实际用量对添加剂进行分装,分装后立即使用或储存于-20℃至-80℃保存。

1.3. 人多能干细胞分化培养基使用前建议在室温平衡 10-20min,不建议在 37℃加热。

 七、实验操作(以 6 孔板为例)

1. 在显微镜下观察人多能干细胞,确认细胞汇合度达到 70–80%,准备传代。

2. 清洗:拿出培养板,吸掉原有培养基,沿培养皿边缘缓慢加入 37℃预热 PBS 缓冲液,轻轻晃动冲洗, 然后吸去 PBS 缓冲液;

3. 消化:在培养板中加入 1.5mL 人多能干细胞消化液(AC-1001008)使之覆盖皿底,并置于 37℃, 5%CO2 培养箱中孵育 2~5 min;

4.  吹打:吸掉人多能干细胞消化液(AC-1001008)后,立刻加入室温平衡好的人多能干细胞分化培     养基,用移液枪扇形吹打培养皿底,吹打次数保持在 3~5 次,使皿底贴附的干细胞集落脱落,轻柔缓慢吹吸混匀,制成干细胞悬液;

注意:吹吸皿底细胞的力度要轻柔,吹打脱落和吹吸混匀的次数在 3~5 次为宜,尽量避免形成单细。如有少量细胞无法从皿底脱落,属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落,需延长消化时间。

5. 制备拟胚体

5.1. 悬滴培养法制备拟胚体

稀释:将细胞悬液稀释,细胞密度约为 1-2×105cells/mL;

 制备悬滴:将稀释好的细胞悬液以 30-50uL/滴(3000-7000 cells/滴),均匀接种在培养皿皿盖内面, 翻转培养皿盖将其扣回加有 PBS 的培养皿上加入 PBS 防止悬滴蒸发),放入 37℃,5%CO2 箱中培养;3-4 天后,非贴壁型培养皿中预先加入人多能干细胞分化培养基,将培养皿盖上的悬滴转移至培养皿中(6cm 培养皿加入 3-4mL 培养基)中,可观察到明显的拟胚体结构,轻轻晃动培养皿使拟胚体均匀分布在培养皿中继续培养。

 5.2. 悬浮培养法制备拟胚体

A. 稀释:将细胞悬液稀释,细胞密度约为 2-5×105cells/mL; B.接种:将稀释好的细胞悬液接种至非贴壁型培养皿内。

 

5.3. 换液

A. 换液频率:使用悬滴法制备拟胚体,将悬滴接入非贴壁型培养皿继续培养后,每 2-3 天换一次液;

使用悬浮培养法制备拟胚体,大约在第 3 天形成明显的拟胚体结构,可进行初次换液,后续每 2-3 天换一次液;

B. 换液方法:将需换液的拟胚体悬液转移至 15mL/50mL 离心管中,静置约 3min,待拟胚体沉降至管底,吸掉上清,加入室温平衡好的人多能干细胞分化培养基,用巴士滴管轻轻转移至非贴壁型培养皿中,轻轻晃动培养皿使之均匀分布在培养皿中,37℃,5%CO2 培养箱中继续培养。

 八、拟胚体形态图

image.png

 

拟胚体形态图


 

九、质量控制

 

检验项目Test Catagories

参考数据Reference Data

外观

Physical Appearance

橙红色液体

Orange-red Liquid

澄清度Clarity

澄清Clear

pH 值

pH Value

7.0-7.4

渗透压Osmolality

270-340

mosm/KgH2O)

无菌

Sterility

无菌

Sterility

支原体Mycoplasma

0.11um 过滤,支原体试验为阴性

The mycoplasma test was negative after 0.11um filtration

细胞生长试验Cell Growth Test

细胞呈克隆状,克隆边缘光滑

The cells are clonal, with smooth edges



人多能干细胞分化培养基; Essential 8 系统培养;埃泽思干细胞培养基;验证细胞分化潜能;

公司简介

埃泽思生物总部位于上海,公司取名Applied Cell(应用细胞),是一家致力于为细胞治aize 疗、再生埃泽思生物总部位于上海,公司取名AppliedCell(应用细胞),是一家致力于为细胞治疗、再生医学提供核心原料,以及研发服务(CRO )和生物药委托开发生产服务(CDMO)的生物科技公司。目前公司产品已经涵盖干细胞、免疫细胞治疗全流程试剂原料。其中核心产品已经完成美国FDADMF备案以及国家药品评审中心(CDE)药物原辅料备案,是国内资质最为齐全的细胞治疗原料供应商之一。目前,公司已与国内6家细胞治疗企业进行细胞治疗一类新药联合申报,一项日本一类新药联合申报。

成立日期 (7年)
注册资本 500万元整
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 5000万-1亿
经营模式 工厂
主营行业 生物化工,细胞培养

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