试剂和器材:
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器、
6. 蒸馏水,容量瓶等
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商品属性:
产品名称:HMGB-1 Elisa Kit
英文名称:Rabbit High mobility group protein B1, HMGB-1 Elisa Kit
型号:EY-00R1770
规格:48T/98T
价格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
服务:可提供免费代测服务,以及产品说明书和技术指导等
保存环境:2-8℃低温、避光、防潮
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
标本要求:
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNATTE-20XLIQ.CONC.TTE浓缩液1L#N/A
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP 小鼠表皮色素细胞完全培养基 100mL炳醋倍录米 BqcloMqthcsonq Dipropionctq 2234-9-8
RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 MouseCOMT儿氧位甲基转移酶250克BR,200u/g
LRPAP1 Others Mouse 小鼠 LRPAP1 / RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) RNASEASOLUTION10MG/ML核糖核酸酶A溶液生物技术级1MLCOLD
人肾上皮细胞裂解物HREpiCL(N-乙酰-L-半胱酸)
大鼠神经小胶质细胞完全培养基 100mLN-DODECYL-β-D-MALTOSIDEN-十二烷基-β-D-麦芽糖苷高级白色粉末FROZENsigma
NUGC-3人胃癌细胞 Human gasic cancer cells NUGC-3 1640+10% FBSTris饱和酚 BUFFqR SOLUTION PH = 6,00 (20 °C) (POTcSSIUM DIxy7noGqN PHOSPHcTq/wo7ium xy7noXIDq)
IFNG Protein Human 重组人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白腺苷 (细胞培养级) Adenosine (≥99%, cell culture tested) 58-61-7 5G 染色剂
NCI-H2087(人非小细胞肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3细胞)人血纤维蛋白,英文名或英文缩写:Fibrin from human plasma,级别:BR,50u/mg,规格:250克
NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系(L-组酸)
HMGB-1 Elisa KitREG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP CHO细胞裂解液 (阳性对照) 水(HPLC grade)质量规格:HPLC gradeWater
人真皮血管平滑肌细胞cDNAHDLEC cDNA马来酸,顺丁1二酸质量规格:AR,HPLC>99%Maleic acid
猪肾细胞;PK-15 子宫内膜腺癌细胞,HEC-1-B细胞 Fc细胞,615小鼠前胃癌瘤株硫酸铵质量规格:>99%,分子生物学级Ammonium sulfate
人胚肾细胞;293FT氯化铯质量规格:>99%,分子生物学级Cesium chloride
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-beta-D-氨基半乳糖苷质量规格:分子生物学级X-Galactosamidide