大肠杆菌通用PCR检测试剂盒含致病性和非致病性

参数规格：
产品名称：大肠杆菌通用PCR检测试剂盒含致病性和非致病性
型号　:　　 EY00P393
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
运输：低温
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
实验操作过程：
一、 CHO DNA 定量参考品的稀释及标准曲线的制备
用试剂盒中提供的 DNA dilution buffer 将 CHO control DNA 进行梯度稀释， 稀释浓度依 次为 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具体操作如下：
1.将试剂盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
轻微振荡混匀，简短快速离心。
2.取 6 支干净的 1.5ml 离心管，分别标记为 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分别加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后涡旋振荡混匀 5- 10s 后短时快速离心 5s，涡旋振荡和快速离心各重复 3 次。
5,按表 2 依次进行 6 次梯度稀释操作，稀释操作同步骤 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀释

二、加样回收质控 ERC 的制备
根据待测样本的残留量设置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加样浓度  (以制备加 45pg  CHO control DNA 的样本 ERC 为例)，操作如下：
1，取待测样本 100u，加至 1.5ml 干净的离心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混匀，标记为样本 ERC。
注：样本 ERC 和同批待测样本需一起进行样本前处理。
三、阴性质控 NEG 的制备

根据实验设置阴性质控，操作如下：
1，取 100ul 样本基质溶液(或洗脱液)加至 1.5ml 干净的离心管中标记为阴性质控 NEG。 注：阴性质控 NEG 样本和同批待测样本需一起进行样本前处理。
四、 qPCR 反应液的制备和加样
1，根据所要检测的标准曲线及待测样本数量，计算所需反应孔数，一般做 3 个重复孔/样。
反应孔数=  (6 个浓度梯度+1 个无模板对照 NTC+1 个阴性质控 NEG+待测样本×2) ×3 注：待测样本×2 是为了让每个待测样本检测时都同时做样本 ERC 。                  2，根据反应孔数计算本次实验所需的各组分的所需总量以制备 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反应孔数+2) ×15ul    (含有 2 孔的损失量)
10×CHO qPCR mix=  (反应孔数+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反应孔数+2) ×2ul
3，各试剂置于冰上融化，振荡混匀，按表 3 所示进行加样：
                                  表 3.各反应孔加样示例

注意事项
1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6.为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
 小梁网细胞cDNAHTMC cDNAD-焦谷氨酸质量规格：0.98D-Pyroglutamic

PT-67细胞，病毒转染小鼠细胞 肺巨细胞癌(PG)的高转移亚系,PG-BE1细胞 肠微血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)D-环丙基丙氨酸质量规格：BRD-Cyclopropylalanine

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)D-叔亮氨酸盐酸盐质量规格：BR，98.5%D-tert-Leucine

TACSTD2 Others Human  OP2 / TACSTD2 细胞裂解液 (阳性对照) DTAC；十二烷基三甲基氯化铵质量规格：>99%,BRDodecyltrimethylammonium chloride(DTAC)

CL-0282HO-8910PM(高转移卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2CTAC;十六烷基三甲基氯化铵质量规格：>99%CTAC

大肠杆菌通用PCR检测试剂盒含致病性和非致病性果胶(半乳糖醛酸(干基计)≥74.0 %)质量规格：半乳糖醛酸(干基计)≥74.0 %Pectin  Rabbitneuophilelastase,NEELISA试剂盒兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒规格：96T/48T  人抗补体1q抗体(C1q)ELISA试剂盒 ，英文名： C1q ELISA Kit

1酸三丁酯(AR,99%)质量规格：AR,99%Tributyl phosphate  小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra/CD121)ELISA试剂盒 ，英文名： IL1Ra/CD121 ELISA Kit  RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISA试剂盒大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1酸三丁酯(CP)质量规格：CPTributyl phosphate  大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA检测试剂盒RatErythropoietin,EPOELISAKit 96T/48T  HumanGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISA试剂盒人糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1酸三丁酯(标准品)质量规格：分析标准品Tributyl phosphate  人TAR DNA结合蛋白43(TARDBP/TDP43)试剂盒 Human TARDBP ELISA Kit  HumanJo-1Aibody,Jo1/HRSELISAKit人Jo1抗体/抗组氨酰NA合成酶抗体(Jo1/HRS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

噻螨酮标准溶液(10μg/ml,u=6%)Hexythiazox solution质量规格：10μg/ml,u=6%  HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit 人1酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

抑霉唑标准溶液(100μg/ml,u=2%)Imazalil solution质量规格：100μg/ml,u=2%  Camellipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA试剂盒骆驼脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒规格：96T/48T  小鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)试剂盒 Mouse suppressors of cytokine signaling 1,SOCS-1 ELISA Kit

头孢克1(标准品)Cefixime质量规格：>98%,标准品  玉米样品处理试剂盒20  痢疾杆菌(SH)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

咪草烟Imazethapyr质量规格：>98%  MouseinhibinB,INH-BELISAKit小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒规格：96T/48T  Humanserineprotease,PRSSELISA试剂盒人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒规格：96T/48T