MC3T3-E1 Subclone 14 (小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)

1.细胞起源：

细胞简称 MC3T3-E1 Subclone 14

细胞别称 MC3T3-E1 SUBCLONE 14

细胞背景描述 从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆，从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14在抗坏血酸和3-4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质(ECM)。MC3T3-E1 Subclone 24和MC3T3-E1 Subclone 30在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化，不形成ECM，可以作为MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14的阴性对照。矿化的亚克隆选择的表达作为成骨细胞标记的mRNA及唾液酸糖蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)和甲状旁腺激素/甲状旁腺激素相关蛋白受体的mRNA。高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出相似数量的胶原质，表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfa1，一种成骨细胞相关转录因子。植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亚克隆形成与骨类似的形成小骨的编织骨，低分化细胞只是产生纤维组织。这些细胞系是研究体外成骨细胞分化的好模型，尤其是ECM信号。它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类似。

供体年龄 新生

组织来源 颅顶骨

细胞形态 成纤维细胞样

细胞类型 自发永生化细胞

生长特性 贴壁细胞

生物安全等级 1

2.培养及保藏：

完全培养基 MEMα(PM150421)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培养环境 空气，95%；CO ₂，5%

37℃

冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

液氮

3.传代方法：

传代步骤

1、吸出原培养液；

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6、收集细胞悬液离心，1200rpm/min 3分钟，离心完吸出上清丢弃；

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

消化时间 2~3分钟

传代比例（密度） 1:3-1:4

换液频次 2~3次/周

本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。