DLD-1（人结直肠腺癌上皮细胞）

1.细胞起源：

细胞简称 DLD-1

细胞别称 DLD 1; DLD1; CoCL3

细胞背景描述 DLD-1细胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在ATCC和其它地方进行的DNA指纹鉴定和染色体组型分析表明DLD-1细胞与HCT-15细胞相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。DLD-1细胞和HCT-15细胞的遗传起源可通过DNA指纹鉴定证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。DLD-1细胞的CSAp阴性(CSAp-)，p53抗原表达呈阳性(p53抗原产生了一个C→T点突变导致241位的Ser→Phe)。DLD-1细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性，癌基因N-myc的表达未做检测。DLD-1细胞表达肿瘤特异性核基质蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1细胞代数不明且污染了支原体，其后经过12周多种抗生素联合培养处理，处理之后每周用Hoechst染色和标准培养法检测。其后连续11个月不加抗生素培养，DLD-1细胞所有的检测呈阴性。

供体年龄 成年

组织来源 结直肠腺癌上皮细胞

细胞形态 上皮细胞样

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 肠癌细胞

生长特性 贴壁细胞

生物安全等级 1

2.培养及保藏：

完全培养基 RPMI-1640(PM150110)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培养环境 空气，95%；CO ₂，5%

37℃

冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

液氮

3.传代方法：

传代步骤 

1、吸出原培养液；

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6、收集细胞悬液离心，1200rpm/min 3分钟，离心完吸出上清丢弃；

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

消化时间 2~3分钟

传代比例（密度） 1:3-1:4

换液频次 2~3次/周

倍增时间 ~24-48 hours