C2C12（小鼠成肌细胞）

1.售前须知：

该细胞贴壁松散，操作时请尽量轻柔；换液时需预热培养基；收货如有大块脱落的细胞团，为正常现象，请按照收货注意事项处理。

2.细胞起源：

细胞简称 C2C12

细胞别称 C2c12; C2-C12; C12

细胞背景描述 C2C12细胞是由D·Yaffe和O·Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆；C2C12细胞分化很快，形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)处理C2C12细胞，会导致C2C12细胞的分化途径从成肌细胞转换为成骨细胞。检测表明，C2C12细胞肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。

供体年龄 不详

组织来源 骨骼肌；品系：C3H

细胞形态 成肌细胞样

细胞类型 自发永生化细胞

生长特性 贴壁细胞

生物安全等级 1

3.培养及保藏：

完全培养基 DMEM(PM150210)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培养环境 空气，95%；CO 2，5%

37℃

冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

液氮

4.传代方法：

传代步骤 1、吸出原培养液；

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6、收集细胞悬液离心，1200rpm/min 3分钟，离心完吸出上清丢弃；

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

消化时间 1~2分钟

传代比例（密度） 1:3-1:4

换液频次 2~3次/周

倍增时间 ~20小时

5.背景资料补充说明：

细胞保藏中心 ATCC; CRL-1772 BCRC; 60083 BCRJ; 0058 DSMZ; ACC-565

6.收货注意事项：

若收到细胞大片脱落，请按照如下处理方式处理： 1、将培养瓶内所有培养基 转入无菌离心管，离心收集细胞（1200rpm 3min）去除旧培养基； 2、用 PBS 重悬细胞，将所有细胞收集到一个离心管中，再次离心（1200rpm 3min）去除PBS； 3、加入1ml左右0.25%胰酶重悬细胞，混匀即可，不能吹打太多次，放入培养箱消化3分钟。 4、消化好后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，迅速加入3-5ml含血清的培养基混匀以终止消化，离心（1200rpm 3min）去除胰酶； 5、加入5ml左右的细胞相应的完全培养基混匀，按比例接入无菌培养瓶/皿中（首次传代推荐1:3）。