【产品型号】
HMD3502，HMD3602-16T，HMD3602-96T。
【包装规格】
100人份、16T/板、96人份/盒。
【预期用途】
用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。其处理后的产物用于临床体外检测使用。
【检验原理】
本品利用高离液盐环境下磁珠对于核酸的特异性吸附能力，将样品裂解物中的核酸富集，经过洗涤清除杂质后，在洗脱液中将富集的核酸释放，达到核酸纯化的目的。
【主要组成成分】
1.HMD3602-16T，HMD3602-96T各功能组分已预先分装于深孔板中，裂解液每人份450μL，清洗液1每人份500μL，清洗液2每人份700μL×2，磁珠每人份600μL，洗脱液每人份50μL。
2.HMD3502将对应人份量的裂解液（450μL/人份）、清洗液1（500μL/人份）、清洗液2（1400μL/人份）、洗脱液（50μL/人份）、磁珠悬液（50μL/人份）分装在不同容器中，使用前由操作人员分别取用。
3.试剂规格说明；
【储存条件及有效期】
室温保存。冷冻会大幅降低磁珠性能，在储存运输中请避免磁珠冻结。有效期12个月。深孔板开封后，需尽快使用。
【适用仪器】
奥盛Auto-Pure32A全自动核酸提取仪及同类仪器。
【样本要求】
1.本产品适用于鼻咽拭子、唾液、尿液、血浆、血清、细胞保存液等液体样本中细胞及病原体的核酸提取。
2.样本收集后应立即放入到可用于核酸检测的细胞保存液中固定、保存，并尽快进行核酸提取。
3.核酸酶会影响本产品的性能。
4.唾液样本：200μL以上唾液样本取200μL使用，不足200μL，请全部使用。
5.干拭子样本：向装有拭子头的样品管中加入400μLPBS（或采样拭子配套的样品储存液），高速旋混匀2min，瞬离后取200μL使用。
6.湿拭子样本：高速涡旋混匀1min，瞬离后吸取200μL使用（如液体不足200μL可添加适量PBS或采样拭子配套的样品储存液后再进行漩涡混匀以及离心操作）。
7.其他液体样本：200μL以上样本取200μL使用，不足200μL，请全部使用。
【检验方法】
见操作步骤。
【自备材料】
1.核酸自动提取仪（针对自动提取方法，本说明以HMD3602-16T搭配奥盛Auto-Pure32A全自动核酸提取仪为例）。
2.96孔深孔板及磁棒套（HMD3502自动提取）。
3.磁力架（HMD3502手动提取）。
【准备工作】
1.使用前请将各缓冲液提前从冰箱取出，待恢复至室温后使用。
2.如裂解液出现少量沉淀，请置于室温或37℃，待沉淀充分溶解后使用。
3.磁珠在每次使用前，必须剧烈摇晃至底部无可见沉淀后方可取用。
【操作步骤】
HMD3602-16T/HMD3602-96T自动提取
1.开封：将深孔板从包装盒内取出，平衡至室温，小心撕下封口膜，如有液体粘附在深孔板封口膜以及管壁上，将液体甩至底部后再开封。
2.加样：将200μL样本加入列1、7（HMD3602-16T）或板1（HMD3602-96T），每孔位对应一个样品。注意：开封后请在20分钟内完成加样操作。
3.上机：按照附表1设定提取程序。将深孔板放入核酸提取仪，磁棒套插入对应槽位，启动程序。待程序完成后，转移洗脱液至离心管中，把产物保存于-80℃。按标准流程，丢弃废液和耗材。
HMD3502手动提取
1.依次将200μL样品、450μL裂解液加入1.5mL离心管，颠倒混匀，55℃孵育5分钟。
2.添加50μL磁珠，室温于旋转混匀仪上旋转孵育10分钟。
3.将含有样品的混合液置于磁力架上，静置2分钟（或至裂解液无色透明）。吸出液相丢弃。注意：如果离心管盖上沾有磁珠，可在静置过程中将离心管与磁力架一同颠倒3-4次将磁珠洗下。
4.去除磁力架，加入500μL清洗液1。颠倒混匀至磁珠完全重悬或用移液器吹打3-4次重悬磁珠。
5.将离心管置于磁力架上，静置1分钟后弃除上清液。
6.去除磁力架，加入700μL清洗液2，重悬磁珠。
7.将离心管置于磁力架上，静置1分钟后弃除上清液。
8.重复步骤6和步骤7。注意：尽量保证将离心管中残余液体吸除完全（包括离心管盖上的残余液体）。
9.将离心管保持于磁力架上，开盖室温静置晾干5分钟。
10.去除磁力架，添加50μL洗脱液，重悬磁珠。55℃孵育5min，孵育期间轻弹离心管2-3次使磁珠分散。
11.将离心管置于磁力架上，静置2分钟，将包含有洗脱核酸的上清转移入新的离心管中。注意：如果离心管壁上有液体附着，请瞬时离心后再进行磁吸操作。
12.按要求丢弃实验废品废液，将纯化核酸样品于适宜条件保存或进行下一步实验。
【检验方法的局限性】
本产品自动化提取需与核酸自动提取仪配套使用。手动提取需与磁力架配套使用。
【注意事项】
1.本品仅限于体外诊断使用，不可用于人体或动物内服外用。
2.提取好的核酸需尽快用于检测，如果不是马上检测的，需将核酸从深孔板中取出，放到无核酸酶的容器内，并放置于-20℃下保存。
3.在操作过程中，请全程穿戴一次性手套、一次性口罩及实验服。使用Nuclease-free耗材等，程度避免RNase污染。裂解液与清洗液1中含有异硫氰酸胍或盐酸胍，会对皮肤及粘膜造成腐蚀，如不慎入眼或接触，请用大量清水冲洗后就医。
4.请勿将废弃液与漂白剂或酸性溶液混合，以免产生有毒挥发性物质。
【产品性能指标】
1.试剂包装外观应完好无损、整洁。
2.各组分净含量：不少于标示量。
3.提取产量：针对100μL~400μL液体样本进行核酸纯化，洗脱液产量不少于42μL。
4.核酸回收率：对标定DNA样品进行核酸纯化，回收率大于90%。
5.核酸纯度：对标定DNA样品进行核酸纯化，所得产物OD260/OD280在1.7-2.0之间。
6.批内精密度：使用标定的参考品，使用企业指定的荧光PCR试剂扩增提取物得到Ct值，其重复性误差CV不大于5％。
7.本品提取产物可进行PCR等分子生物学检测。
Eg：200μL浓度为5×103IU/mL的COVID-19假病毒咽拭子样本，经本试剂盒提取，采用COVID-19检测试剂盒对提取产物进行检测。平行10组实验，检出率100%，Ct重现性良好，结果如图1所示。对不同浓度COVID-19假病毒咽拭子样本（5×101IU/mL，5×102IU/mL，5×103IU/mL，5×104IU/mL，5×105IU/mL）提取产物进行RT-qPCR检测，结果显示对不同病毒浓度样本均提取能力良好，且区分度明显，对RT-qPCRCt值与假病毒拷贝数的对数进行线性回归分析，结果显示，提取产物线性度良好。
