小鼠B细胞淋巴瘤细胞

一、细胞基本属性

细胞名称：小鼠B细胞淋巴瘤细胞

细胞别称：A20

细胞货号：SNL-153

细胞种属：小鼠

生长情况：半贴壁

培养条件：1640+10%FBS+1%双抗

培养环境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

二、细胞培养操作

换液周期：2-3天

培养基体积：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml

传代比例：1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法：

1.轻轻吸走培养上清，留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞；

2.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清；

3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；

补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；

注意事项：半贴壁细胞会附着瓶底，但贴壁不紧，轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化。建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、细胞冻存操作

冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);

冻存规格：200-300万/ml，1ml每管

冻存方法：

1.离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；

2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；

将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存

注意事项：冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

Tips：

1.细胞半贴壁圆形生长，部分悬浮圆形，传代时均可收集培养，换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶，若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞；

2.传代有部分细胞碎片可以换液后用PBS润洗细胞清除，使用的PBS需要恢复到室温，加入时不要冲到细胞面，润洗尽量轻柔；

3.该细胞生长较快，培养基消耗较快，培养时注意密切关注细胞状态，密度较高、培养基有变黄趋势时及时换液避免细胞状态变差；

我们推荐使用尚恩生物A20（小鼠B细胞淋巴瘤细胞）专用完全培养基（产品货号：SNLM-153）作为体外培养A20（小鼠B细胞淋巴瘤细胞）的培养基。