"WiDr:人结直肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PANC0813细胞类似产品::293c18细胞、P3/ag细胞、BRL-3A细胞
NCI-H250细胞类似产品::H-295细胞、H1341细胞、NCI-H226细胞
MDA-MB-231 #4175细胞类似产品::REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞
X63-Ag8-653细胞类似产品::CemT4细胞、C-4-I细胞、NCIH1155细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:结肠癌;女性
WiDr:人结直肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
H719细胞类似产品::CAL-78细胞、MV411细胞、HuT 78细胞
MOPC细胞类似产品::HS-294细胞、GM3570细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞
PATU-S细胞类似产品::SHZ-88细胞、NCI-460细胞、SW620细胞
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
MV-1-Lu细胞类似产品::BIU-87/Adr细胞、NOZC-1细胞、T 98 G细胞
OAW-42细胞类似产品::SKNDZ细胞、Granta519细胞、NCIH2085细胞
MG-63细胞类似产品::TEV-1细胞、NRK-52E细胞、FK81细胞
Jurkat (clone E6-1)细胞类似产品::SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞
Pt K1细胞类似产品::Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞
IPAM-WT细胞类似产品::Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞
E.G7-OVA细胞类似产品::EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞
UWB1.289细胞类似产品::118MG细胞、NCIH196细胞、FD-LSC-1细胞
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NCI-H292细胞类似产品::FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
LLC-MK2细胞类似产品::Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞
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BEP2D细胞类似产品::HuT102细胞、HFL-I细胞、LS-1034细胞
Wistar Institute, Susan Hayflick细胞类似产品::HEK293-EBNA1细胞、RPMI-1846细胞、JROECL 21细胞
DMS-79细胞类似产品::U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞
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CL1.0细胞类似产品::COR-L 105细胞、M14-MEL细胞、MMAc-Serum Free细胞
Hs675T细胞类似产品::A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞
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H2126细胞类似产品::AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞
UACC812细胞类似产品::SNU-719细胞、HAEC细胞、SW1990细胞
HC11细胞类似产品::MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
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RT112细胞类似产品::RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞
Hs 695.T细胞类似产品::HSC6细胞、IBRS-2细胞、CHL-11细胞
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Laboratory of Allergic Diseases 2细胞类似产品::SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
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K1735细胞类似产品::C3H 10T1/2细胞、Hs 742.T细胞、LI7细胞
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HCC-2279细胞类似产品::HPAEC细胞、UMRC2细胞、UO31细胞
SNU-761细胞类似产品::HM1900细胞、MES 13细胞、769P细胞
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NCI-H1568细胞类似产品::MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞
HCC9204细胞类似产品::BEL 7402细胞、RKO_AS45细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞
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LC-2 ad细胞类似产品::C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
SKO007细胞类似产品::L1210细胞、BL-6细胞、HNE-3细胞
PLA-802细胞类似产品::BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞
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MDA435细胞类似产品::NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
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3T3F442A细胞类似产品::Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
WiDr:人结直肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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SW837细胞类似产品::MRC 5细胞、293AD细胞、EBC-1细胞
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