"LAD 2:人肥大复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
贴壁细胞冻存注意事项:细胞冻存液需提前配制,不可直接将DMSO加入细胞悬液中;不同细胞消化时间有差异,以实际镜检结果为准,大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化,消化时间不宜过长;应选择汇合度80%-90%左右,细胞处于对数生长期时进行冻存操作,确保细胞冻存时状态Zui佳,冻存密度可根据细胞性进行调整;冻存细胞保存温度应低于-130℃,不可在-80℃长期保存。贴壁细胞冻存操作步骤:从培养箱中取出准备冻存的细胞;显微镜下观察细胞状态并拍照记录;酒精消毒培养瓶后放入安全柜中;吸去多余的培养基,加人2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次;加入1ml胰酶,放入37℃消化;消化1min左右,在显微镜下观察细胞消化情况;消化完全后,加3ml完全培养基终止;将细胞悬液移入15ml离心管中离心,1000rpm/min(约200g)离心3-5min;吸去多余的液体,向细胞沉淀中加入适量的冻存液,轻轻吸打混匀;按比例分装至冻存管中;贴HAO标签后放入梯度冻存盒中;将冻存盒放入-80℃,降温过夜后,移入液氮中保存。贴壁细胞冻存实验准备事项:将15mL离心管、冻存管、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒灭菌;细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、细胞冻存液等从4℃冰箱中取出后,复温至室温,备用;程序降温盒复温至室温备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HEC1-B细胞类似产品::HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞
CMT-64细胞类似产品::GP2d细胞、tdott细胞、UMNSAH-DF1细胞
LoVo细胞类似产品::KYSE 270细胞、SNU878细胞、NCI-H1105细胞
EAhy926细胞类似产品::Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:肥大细胞
LAD 2:人肥大复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
U-937细胞类似产品::MPC 11细胞、JM细胞、Epstein-Barr-2细胞
Baby Hamster Kidney-21细胞类似产品::UMC-11细胞、SW527细胞、HCC4006细胞
SUM-159-PT细胞类似产品::Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
LAD 2:人肥大复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过GAO时,易造成培养基中细胞碎片增多,黑渣子增多,常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化,对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化,细胞密度过GAO超过80%时,采用分步消化法。胰酶储存在-20°C,解冻在4°C进行,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于-20°C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤:消化过度细胞碎片增多,黑渣子增多,细胞会成片脱落,严重影响细胞活性,并有部分细胞漂浮,随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下,反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同,胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度,是否含EDTA,胰酶的储存时间,胰酶的储存温度,是否反复冻融,消化加入的胰酶体积,消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞,建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间,可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆,记录Zui佳消化时间,下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
B95.8细胞类似产品::BC-3-H-I细胞、HT29细胞、Kit-225-K6细胞
DHL-6细胞类似产品::MLMA细胞、H719细胞、A549/DDP细胞
MDA-MB453细胞类似产品::CCD966SK细胞、NCI-H1734细胞、NCIH2135细胞
Hs 888.Lu细胞类似产品::HT细胞、PL12细胞、P3J细胞
OCI/AML-4细胞类似产品::IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞
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hA549细胞类似产品::MOLT16细胞、OVCA420细胞、Hs863T细胞
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LAD 2:人肥大复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
MX-1细胞类似产品::HFE-145细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、N-2a细胞
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TE354T细胞类似产品::A2008细胞、RPMI6666细胞、PANC 813细胞
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Hs888 Lu细胞类似产品::NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞
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LAD 2:人肥大复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞类似产品::LNCaP-FGC细胞、HOC-1细胞、CMT-64细胞
MC-3T3-E1细胞类似产品::NUGC-4细胞、Mo 59J细胞、NCI-SNU-182细胞
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BLO11细胞类似产品::H508细胞、H522细胞、C918细胞
M-14细胞类似产品::SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞
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