"HCT 116:人结肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
TK10细胞类似产品::KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞
T98G细胞类似产品::RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
KE39细胞类似产品::HFT8810细胞、ChaGo K-1细胞、HBE 135-E6/E7细胞
aTC1 Clone 6细胞类似产品::D407 RPE细胞、NCTC 1469细胞、4T1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:结肠腺癌;男性
HCT 116:人结肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
HCO细胞类似产品::SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
MDA 231-LM2-4175细胞类似产品::University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、Ca761细胞、H719细胞
STO细胞类似产品::NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
HCT 116:人结肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
AR4-IP细胞类似产品::S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞类似产品::Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞
LUDLU 1细胞类似产品::HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞
TK-10细胞类似产品::Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞
MES-SA Dx5细胞类似产品::Hs294细胞、HSC6细胞、C-33 A细胞
MUG-Chor1细胞类似产品::Mv1.Lu细胞、L细胞、SW 1783细胞
MGECs细胞类似产品::SKBR-3细胞、Hs 611.T细胞、QBC(939)细胞
H-865细胞类似产品::Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞
CTX TNA2细胞类似产品::JB-6 Cl 30细胞、USMC细胞、C-32细胞
TGW-nu-1细胞类似产品::Hep2细胞、SW 626细胞、SF-539 BT细胞
HEK293F细胞类似产品::SUDHL-2细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞、SupT1细胞
H-187细胞类似产品::Hs27F细胞、MDA-MB468细胞、JTC-39细胞
LS-1034细胞类似产品::NCI-H2107细胞、OsACL细胞、A 549细胞
HMCB细胞类似产品::Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MDCKII-WT细胞、NPC-TW 01细胞
Walker-256-TC细胞类似产品::CWR22R细胞、EFM192细胞、MV(4;11)细胞
MT-3 [Human leukocytes]细胞类似产品::PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞
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VMM39细胞类似产品::A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞
NCI-H841细胞类似产品::BNL.1ME A.7R.1细胞、NOZAWA细胞、Colo16细胞
LL/2细胞类似产品::MDA-436细胞、TCCPAN2细胞、BEP2D细胞
L929(NCTC)细胞类似产品::C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞
VK2细胞类似产品::COR-L26细胞、H2170细胞、H2171细胞
HIT细胞类似产品::SUM-52细胞、PLA801C细胞、MEL-526细胞
H1437细胞类似产品::C918细胞、THP1细胞、HGC27细胞
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SK-MES细胞类似产品::624-mel细胞、BBE细胞、MPP 89细胞
H2052细胞类似产品::K-562细胞、P560细胞、L cells (TK-)细胞
SW1222细胞类似产品::HRA 19细胞、Normal Rat Kidney-49F细胞、HCC941122细胞
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Panc327细胞类似产品::KPL-1细胞、BEL-7402细胞、COLO-320HSR细胞
RMS 1598细胞类似产品::PC 61.5.3细胞、JJN-3细胞、NCIH1693细胞
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LUDLU 1细胞类似产品::HCC9204细胞、H295R-S1细胞、MSTO-211细胞
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VMRC-RCZ细胞类似产品::SW-839细胞、H-358细胞、Panc02.03细胞
B958细胞类似产品::J774A.1细胞、C4-2 Bone metastatic细胞、NCI-H2195细胞
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WM 239细胞类似产品::PAEC细胞、DLD-1细胞、HCT8细胞
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DI TNC-1细胞类似产品::MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞
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HEL 299细胞类似产品::H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞
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TE-671细胞类似产品::LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞
YES2细胞类似产品::MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞
L-5178-Y-R细胞类似产品::WPE-int细胞、SW260细胞、OUMS23细胞
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Beta-TC-6细胞类似产品::HEK 293-F细胞、2T细胞、OCI-Ly10细胞
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HPAFII细胞类似产品::UM-UC-1细胞、SKG-3a细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞
NKL细胞类似产品::Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、C4-2 B细胞、SW 1222细胞
COS7细胞类似产品::BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞
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PC12(高分化)细胞类似产品::Oregon J-111细胞、HO-1-N-1细胞、PC3细胞
HCT 116:人结肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
HBL 100细胞类似产品::RKOE6细胞、HCT 8细胞、ZR751细胞
H-345细胞类似产品::V79细胞、X63.Ag8.653细胞、MDA-PCa-2b细胞
SMA 560细胞类似产品::HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
2V6.11细胞类似产品::IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
ECC 12细胞类似产品::GC-2细胞、J774细胞、3T3 J2细胞
NCIH1666细胞类似产品::MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞
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