HCT116人结肠癌细胞

HCT116人结肠癌细胞

 细胞特性:

HCT116是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞之一。 在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮样的肿瘤。

细胞特性

1） 来源：结直肠癌

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1细胞背景与临床意义

来源：

源自一名48岁男性结肠腺癌患者的原发肿瘤组织（1979年建系），微卫星不稳定型（MSI-H的经典模型，代表约15%的散发性结直肠癌。

分子特征：

标志性突变：

KRAG13D（不同于常见的G12突变）；

PIK3CH1047R（PI3K通路激活）；

MLH甲基化导致错配修复缺陷（MMR-D）。

表型特点：

上皮样形态，贴壁生长；

对5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感，但对奥沙利铂耐药。

2核心科研价值

（1）肿瘤机制研究

DNA修复缺陷：

用于研究MMR-D对免疫治疗响应（如PD-1抑制剂敏感性）；

代谢重编程：

糖酵解活性强（LDHA高表达），适合靶向代谢研究（如HK2抑制剂）。

（2）药物开发平台

靶向治疗：

KRAG13D特异性抑制剂（如MRTX1133）的测试模型；

联合策略：

2024年NaturMedicine报道MEK抑制剂+免疫检查点阻断的协同效应。

3培养标准操作

参数  条件  关键注意事项

培养基  McCoy’510FBS  避免频繁换液（维持代谢稳态）

传代  0.25%胰酶+0.02EDTA消化3分钟  汇合度达80%时传代（防接触抑制）

冻存  90FB10DMSO，程序降温  复苏后需静置72小时恢复药敏性

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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