"F81:猫肾复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Ketr3细胞类似产品::HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
DMS 114细胞类似产品::MDAMB175VII细胞、BrCL12细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞
HFF1细胞类似产品::BNL 1ME A.7R.1细胞、MB39细胞、H295R-S1细胞
MILE SVEN1细胞类似产品::3T3-A31细胞、HuH7细胞、IFRS1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:肾;自发永生;雌性
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细胞形态:上皮细胞样
BE(2)M17细胞类似产品::Mhh-Call 2细胞、MPP-89细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞
Ocular Choroidal Melanoma-1细胞类似产品::XuanWei Lung Cancer-05细胞、A375-SM细胞、CHP 212细胞
HuH6细胞类似产品::Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
HTR8细胞类似产品::JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
RCK8细胞类似产品::HCC-1954BL细胞、NCI H929细胞、C3H 10T1/2细胞
PCI:SG231细胞类似产品::NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞
KP-2细胞类似产品::NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
RPMI1788细胞类似产品::NCI-H1436细胞、UM-UC14细胞、NCI-H1436细胞
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C2BBe 1细胞类似产品::KYSE-510细胞、Hepa-RG细胞、130T细胞
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Medical Research Council cell strain-9细胞类似产品::NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞
PaTu-8988s细胞类似产品::8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞
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L M (TK-)细胞类似产品::UT-7细胞、FRTL-5细胞、58F细胞
SUP-B1细胞类似产品::RPMI 7951细胞、Hep-G2细胞、SKLMS1细胞
MCF-7/ADR-RES细胞类似产品::PT67细胞、B16-F0细胞、MDAMB-231细胞
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T HEECs细胞类似产品::N1E-115细胞、NALM 6细胞、SHG-44细胞
MT4细胞类似产品::B6Tert-1细胞、XWLC-05细胞、MRC-5细胞
HCC-1171细胞类似产品::MCF-10A细胞、LNCaP.FGC细胞、FDC-P1细胞
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K-562细胞类似产品::GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞
NB1-RGB细胞类似产品::D10.G4.1细胞、SW 1116细胞、C-4 I细胞
KYSE270细胞类似产品::2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞
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SK-Hep1细胞类似产品::Hepatoma 22细胞、YH细胞、Mink Lung细胞
CEM-CCRF (CAMR)细胞类似产品::H-358细胞、SKM-1细胞、Epstein-Barr-3细胞
5-8F细胞类似产品::Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞
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X63-Ag8.653细胞类似产品::LU451细胞、H-196细胞、SHIN3细胞
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BEAS2B细胞类似产品::JOSK-M细胞、MCA 38细胞、WM-239-A细胞
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WiDr细胞类似产品::HPAF细胞、TOV-112细胞、L cell细胞
HcaF细胞类似产品::H8细胞、YD-15细胞、RT-112细胞
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HRVEC细胞类似产品::CCK-81细胞、COLO_320DM细胞、L-6细胞
Metastatic Variant 522细胞类似产品::ZR-75-30细胞、MV3细胞、MKN-74细胞
HS0578T细胞类似产品::L cells (TK-)细胞、TK 10细胞、MGc80-3细胞
B-3细胞类似产品::COLO-738细胞、Hs578Bst细胞、H-2452细胞
GM-346细胞类似产品::OVHM细胞、KM H-2细胞、NBLS细胞
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Pt-K2细胞类似产品::MDA 231-LM2-4175细胞、HFT-8810细胞、HKF细胞
FF-WT-BJ细胞类似产品::hTERT-HPNE细胞、R 2 C细胞、H-4细胞
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Mouse Forestomach Carcinoma细胞类似产品::MCA 205细胞、GM00346B细胞、Capan-1细胞
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H727细胞类似产品::OCM-1细胞、A2780/CP70细胞、NCI-H358细胞
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RPMI-1788细胞类似产品::NCIH1693细胞、LK2细胞、SCC-1395细胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞类似产品::SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
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F81:猫肾复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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