F81 (猫肾细胞) (种属鉴定正确)

F81 细胞是一种猫细胞系，特异性来源于猫肾组织。这些细胞主要用于与猫病毒研究相关的研究，包括猫杯状病毒 （FCV），这是一种影响全球猫的重要病原体。F81 细胞系以其对各种 FCV 菌株的敏感性而闻名，使其成为病毒学研究中不可或缺的工具，用于开发旨在控制猫科动物病毒感染的疫苗和治疗策略。

猫

肾 贴壁生长 上皮细胞样

完全培养基：RPMI-1640 + 10%FBS + 1P/S
气相：95% 空气 + 5% CO2
温度：37℃

传代比例：1：2 ~ 1：4
传代方法：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。最后将细胞悬液按传代比例分到新的含5~8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

冻存液配制：完全培养基 + 10% DMSO 或 90% FBS + 10% DMSO
冻存方法：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。以T25瓶为例：细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。1000 rpm离心 5min 去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。将冻存管置于程序降温盒中，放入-80℃冰箱，至少2h以后转入液氮灌储存。注意及时复苏检查冻存情况，便于及时调整。

将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃ 水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000 rpm 条件下离心4分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm 皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 3M;Female 自发永生化细胞