"VA-ES-BJ:人上皮样肉瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SW 403细胞类似产品::NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
DoTc2 4510细胞类似产品::COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞
NCIH661细胞类似产品::YTMLC-90细胞、H1618细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞
SK-MEL5细胞类似产品::HemECs细胞、HUT-28细胞、SW 403细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
VA-ES-BJ:人上皮样肉瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
H-711细胞类似产品::GM03570细胞、SNK1细胞、NIT-1细胞
MN9D细胞类似产品::U251n细胞、Vero from pool #76细胞、HAPI细胞
Tu-177细胞类似产品::MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:3传代,每周2次
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁生长
传代24h-48h处于对数期的细胞,在冻存前24h换液;按照常规方法消化,离心,收集细胞沉淀;用血清重悬细胞沉淀,用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数;配制细胞冻存液,将冻存液加到细胞液中,吹打混匀,控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml;将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中,旋紧管盖;将冻存管放入程序冻存盒中,冻存盒立即移至-80°C冰箱中,过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳,会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液;消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率;冻存细胞时为按照温度梯度进行操作,会严重影响细胞活率。
MGH-U1细胞类似产品::OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞
NCI-SNU-407细胞类似产品::CAMA1细胞、UC-3细胞、H-2009细胞
HT 1376.T细胞类似产品::U138细胞、hADSCs细胞、OVCA432细胞
M2-10B4细胞类似产品::CMT 64细胞、IOSE-Van细胞、H522细胞
HCE细胞类似产品::HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞
CAL 12T细胞类似产品::HOS-TE85细胞、SW-1990细胞、MES-SA/Dx-5细胞
HEC-1-A细胞类似产品::WSU-DLCL2细胞、U-87 MG细胞、Ramos.2G6.4C10细胞
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AML193细胞类似产品::NCIH146细胞、MOLP2细胞、GM01232E细胞
RCC-4细胞类似产品::A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞
RPVSMC细胞类似产品::SUM-149细胞、NCI-H1651细胞、NCIH1975细胞
F9细胞类似产品::Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
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A-2780细胞类似产品::H9c2细胞、SCL-2细胞、BALL1细胞
WERI-Rb 1细胞类似产品::C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞
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HEK/293细胞类似产品::VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞
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SUM-52细胞类似产品::AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞
L 363细胞类似产品::WEHI 3B细胞、MDCK.2细胞、LU451细胞
Centre Antoine Lacassagne-78细胞类似产品::H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞
EBC-1/original细胞类似产品::Caki-2细胞、ACC-3细胞、AN-3细胞
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BV2细胞类似产品::KYSE 520细胞、HCC-2108细胞、SKG3A细胞
BALL1细胞类似产品::Wien 133细胞、HEH2细胞、UCLA-SO-M21细胞
C 6细胞类似产品::3T3-L1细胞、NT2D1细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞
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Chang Cells细胞类似产品::Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞
LOU-NH91细胞类似产品::CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞
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NB-19细胞类似产品::HREC细胞、PGLH7细胞、F98细胞
HPF细胞类似产品::2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞
CCD966SK细胞类似产品::KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞
SK MEL 5细胞类似产品::OVCA 420细胞、AKR细胞、Case 3细胞
BT-B细胞类似产品::HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞
BrCL18细胞类似产品::MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞
H1944细胞类似产品::Giant Cell Tumor细胞、HFF1细胞、8505C细胞
DHL-16细胞类似产品::MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞
HCC1954BL细胞类似产品::HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
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SW 1463细胞类似产品::HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞
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Sf-21细胞类似产品::KAT5细胞、MiaPaca.2细胞、PC10细胞
HT clone H9细胞类似产品::AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞
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S3-HeLa细胞类似产品::Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞
OV1-P细胞类似产品::H740细胞、SK-ChA-1细胞、UPCI:SCC154细胞
G-361细胞类似产品::U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞
KMS-18细胞类似产品::MALME.3M细胞、TCam 2细胞、HH [Human lymphoma]细胞
HNSC细胞类似产品::HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞
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P31/FUJ细胞类似产品::SNUC2A细胞、NFS-60细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞
PC9细胞类似产品::CNE1细胞、HME-1细胞、SU-DHL-6细胞
Panc 10.05细胞类似产品::U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞
IMR 32细胞类似产品::RenCa细胞、TE-85 clone 5细胞、BxPC-3细胞
PSN-1细胞类似产品::BJ1细胞、TE15细胞、NCIH1792细胞
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ACC3细胞类似产品::SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞
H1694细胞类似产品::beta TC6细胞、TE671细胞、CCRF/CEM/0细胞
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MDA-436细胞类似产品::RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞
RBL-1细胞类似产品::RBVEC细胞、Hs 604.T细胞、GM00215细胞
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NCI-HUT-125细胞类似产品::Ramos.2G6.4C10细胞、Jurkat E6细胞、C33细胞
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NS-20Y细胞类似产品::CCRF CEM细胞、VK2细胞、U2932细胞
Soleus clone 8细胞类似产品::Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞
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HK-2 [Human kidney]细胞类似产品::University of Arizona Cell Culture-812细胞、KBM-7/Hap8细胞、H-522细胞
C32r细胞类似产品::NB19细胞、HEI193细胞、SF763细胞
A2780S细胞类似产品::OE-33细胞、3T3 clone A31细胞、WSU-DLCL2细胞
HS-683细胞类似产品::HTori3细胞、OK-WT细胞、HCC 38细胞
H4IIE细胞类似产品::H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞
H9c2(2-1)细胞类似产品::MFE296细胞、PLCPRF5细胞、HCC0044细胞
HEY A8细胞类似产品::ME-180细胞、H-2198细胞、CMK细胞
H-1838细胞类似产品::SVG p12细胞、H1734细胞、WM-239A细胞
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COR-L279细胞类似产品::NS1细胞、Caov-4细胞、HCC0015细胞
BE(2)-M17细胞类似产品::H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞
SNU638细胞类似产品::NIH:OVCAR3细胞、SP2-0-Ag14细胞、AD293细胞
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SKMES-1细胞类似产品::PCI-04B细胞、MDBK细胞、GES1细胞
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OCILY10细胞类似产品::HLF-a细胞、RSMC细胞、C3H10T1/2 clone8细胞
HemECs细胞类似产品::Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞
F9细胞类似产品::Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
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PBMC细胞类似产品::kms 11细胞、LLC-MK-2细胞、526-mel细胞
LN382细胞类似产品::526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
H-128细胞类似产品::NCI-H125细胞、UO-31细胞、H-9细胞
Panc203细胞类似产品::SCH细胞、HCASMC细胞、Human podocyte细胞
MKN 28细胞类似产品::AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞
MonoMac 6细胞类似产品::MDA-MB-231-luc细胞、LA795细胞、AMC-HN-8细胞
H-1395细胞类似产品::A549-Taxol细胞、NCI-322细胞、UO-31细胞
VA-ES-BJ:人上皮样肉瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Ramos (RA 1)细胞类似产品::hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
OAC-P4C细胞类似产品::Hut292细胞、Karpas 422细胞、AG06814-M细胞
BAEC细胞类似产品::C28/I2细胞、H295细胞、LK2细胞
NCI-H747细胞类似产品::C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞
Caco-2 BBe细胞类似产品::RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞类似产品::H2347细胞、DSL-6A-C1细胞、RIMEC细胞
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