"GES-1:人胃黏膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
P3/NSI/1-AG4-1细胞类似产品::SW 1088细胞、Alexander细胞、CAL-148细胞
HR-1细胞类似产品::HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
DC 2.4细胞类似产品::526细胞、HFLS-OA细胞、NBL-S细胞
NCI-1155细胞类似产品::GM05372细胞、MCF7-GFP细胞、102PT细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
GES-1:人胃黏膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
B16BL-6细胞类似产品::MMQ细胞、Ca 9-22细胞、H1755细胞
SCC 9细胞类似产品::MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞
Hx147细胞类似产品::343 MG细胞、BJAB细胞、COLO 394细胞
细胞培养无菌操作的演示:凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌,继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处,使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自来水刷洗,除去灰尘。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清洁液浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,Zui后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒:包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
GES-1:人胃黏膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
EA hy 926细胞类似产品::GM00637B细胞、SUDHL-6细胞、HS-68细胞
MXI细胞类似产品::Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞
H766T细胞类似产品::Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞
B16F10细胞类似产品::CFPAC细胞、SupB15WT细胞、NB1RGB细胞
HCC1954-BL细胞类似产品::HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
3T3 J2细胞类似产品::Henrietta Lacks cells细胞、RPMI 8402细胞、G-401细胞
SUM-52PE细胞类似产品::GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
CCD1095Sk细胞类似产品::NCI-H711细胞、ETCC-007细胞、MM134细胞
HFF1细胞类似产品::BNL 1ME A.7R.1细胞、MB39细胞、H295R-S1细胞
AMO1细胞类似产品::RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞类似产品::BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
MDA-453细胞类似产品::JCA1细胞、CHP-100细胞、Caco-2/BBe 1细胞
OVCAR 4细胞类似产品::TSCC1细胞、HIEC细胞、NPA-87细胞
A 172细胞类似产品::A427细胞、BEAS2B细胞、Tissue Culture-1细胞
OCIAML5细胞类似产品::Leukemia 1210细胞、HS-294细胞、HEL-92-1-7细胞
NTera2/D1细胞类似产品::PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞
NTera2/D1细胞类似产品::PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞
RMG1细胞类似产品::MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
LNCaP细胞类似产品::Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞
KYSE180细胞类似产品::RSC-96细胞、SU4细胞、JROECL21细胞
NCI747细胞类似产品::N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞
SF 295细胞类似产品::MDA-MB 453细胞、SW-1116细胞、HuP-T3细胞
KYSE180细胞类似产品::RSC-96细胞、SU4细胞、JROECL21细胞
MARC145细胞类似产品::FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞
GES-1:人胃黏膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
EL 4细胞类似产品::L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞
OV1-P细胞类似产品::H740细胞、SK-ChA-1细胞、UPCI:SCC154细胞
BL2141细胞类似产品::CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞
KRC Y细胞类似产品::L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
ST细胞类似产品::HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞
PLC-8024细胞类似产品::aTC1-6细胞、BT-B细胞、AMC-HN8细胞
231-luc细胞类似产品::BTT739细胞、HCC-2185细胞、RPE1-hTERT细胞
MLA 144细胞类似产品::ATDC-5细胞、CAL 51细胞、NCI-H1650细胞
H719细胞类似产品::CAL-78细胞、MV411细胞、HuT 78细胞
Kit225-K6细胞类似产品::NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
NCIH2228细胞类似产品::KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞
MDCK (NBL-2)细胞类似产品::KMS-26细胞、As-PC1细胞、NCI-H69C细胞
HDMEC细胞类似产品::Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞
CFPAC细胞类似产品::NCIH524细胞、HEL9217细胞、DMS-153细胞
Hs.27细胞类似产品::H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞
MOLM-14细胞类似产品::C-643细胞、OCI-Ly07细胞、PANC0203细胞
NCI-H740细胞类似产品::LA-N-6细胞、AM细胞、Panc_08_13细胞
MDA453细胞类似产品::EMT-6细胞、CEM clone 7细胞、P3/X63-Ag8细胞
HCa/16A3-F细胞类似产品::SHEP1细胞、CCK-81细胞、RA.1细胞
ChaGo-K-1细胞类似产品::Michigan Cancer Foundation-7细胞、LS123细胞、CAKI1细胞
EC-9706细胞类似产品::LTEP-s细胞、BaF3细胞、G292细胞
EC-9706细胞类似产品::LTEP-s细胞、BaF3细胞、G292细胞
B-16细胞类似产品::SU-86-86细胞、U-2 OS细胞、H1975细胞
HFL 1细胞类似产品::MIA Paca2细胞、Panc 04.03细胞、HCC-1937细胞
MKN-7细胞类似产品::KM12 SM细胞、108CC15细胞、NR-8383细胞
CO115细胞类似产品::SK.MEL.5细胞、PECAPJ34细胞、MADB-106细胞
HO8910/PM细胞类似产品::Bac12F5细胞、U-118-MG细胞、MUS-M1细胞
CDC/EU.HMEC-1细胞类似产品::NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞
Vero from pool #76细胞类似产品::TM-3细胞、DoTc2 4510细胞、HCE-2 [50.B1]细胞
Pro-Lec1.3C细胞类似产品::3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
SUM-52PE细胞类似产品::GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
RPMI2650细胞类似产品::H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
Panc_02_03细胞类似产品::OCI-LY-19细胞、HCC1954-BL细胞、KU1919细胞
RC92A细胞类似产品::NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞
BE2-M17细胞类似产品::COLO680N细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞、SW1222细胞
SK-N-BE(2C)细胞类似产品::MOLP8细胞、HBMEC细胞、YD-38细胞
Y3.AG.1.2.3细胞类似产品::Rat Fetal Lung-6细胞、C-4 I细胞、T241细胞
H748细胞类似产品::MJ细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞、UCH1细胞
Jurkat (clone E6-1)细胞类似产品::SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞
3AA细胞类似产品::Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、LN299细胞、F9细胞
U-266细胞类似产品::EA.hy 926细胞、NCI H508细胞、HCC-1500细胞
rRTEC细胞类似产品::H596细胞、NCI-H1105细胞、MCF7ADR细胞
GM00637H细胞类似产品::A101D细胞、SUDHL16细胞、IM-95细胞
RK13细胞类似产品::CCLP1细胞、AMJ2C8细胞、H-2444细胞
Epithelioma Papulosum Cyprini细胞类似产品::EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞
MCF-12F细胞类似产品::COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
HEK293T/17细胞类似产品::SKNSH细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞、SUM149PT细胞
Hs888Lu细胞类似产品::COLO 829细胞、Y79细胞、SUM52PE细胞
Oka-C1细胞类似产品::H-719细胞、NCI-H322细胞、HHFK细胞
NG-108-15细胞类似产品::TC-1 [Mouse lung]细胞、CL11细胞、BNL CL.2细胞
NCI-H660细胞类似产品::SK-MEL5细胞、GM03573细胞、LS 1034细胞
U-251细胞类似产品::Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞
SNU-601细胞类似产品::NT2/D1细胞、PANC-03-27细胞、DSL-6A-C1细胞
MCF10A细胞类似产品::NCI-H647细胞、GP5d细胞、CV-1.K细胞
HCT GEO细胞类似产品::ISHI细胞、Rainbow Trout Embryo细胞、T_T_细胞
ATDC5细胞类似产品::L23/P细胞、RGC-6细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞
MCF10A细胞类似产品::NCI-H647细胞、GP5d细胞、CV-1.K细胞
H-1963细胞类似产品::CTX TNA2细胞、OCI-AML-4细胞、SK-MEL24细胞
H-1963细胞类似产品::CTX TNA2细胞、OCI-AML-4细胞、SK-MEL24细胞
HCC1954-BL细胞类似产品::HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
LP1细胞类似产品::SW480细胞、HCC 94细胞、AML12细胞
NCI-H865细胞类似产品::SU-DHL-6细胞、AZ-521细胞、SU-DHL-2细胞
Huh7.5细胞类似产品::Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞
SK-Mel 1细胞类似产品::Hs 683细胞、KYSE 140细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞
NKT细胞类似产品::MASMC细胞、Tca8113细胞、SKMEL5细胞
SHI1细胞类似产品::RAG细胞、U266 Bl细胞、LIM1215细胞
OKT 3细胞类似产品::SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞类似产品::OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
MDCK2细胞类似产品::MDA-MB-134细胞、Jurkat77细胞、SPC-A-1细胞
MIO-M1细胞类似产品::PL12细胞、OCI/AML2细胞、ZR7530细胞
Hs 940.T细胞类似产品::CoC1细胞、TE10细胞、MEF (CF-1)细胞
MDA435细胞类似产品::NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
ssMCF7细胞类似产品::Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
Cloudman S91 melanoma细胞类似产品::COLO 206细胞、CAL39细胞、NCI-522细胞
RPMI-6666细胞类似产品::SKG3A细胞、MC-116细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞
MNNG-HOS (Cl#5)细胞类似产品::P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
Epstein-Barr-3细胞类似产品::SHG44细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、NEC-8细胞
NCIH196细胞类似产品::YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
MC3T3细胞类似产品::P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞
D341 Med细胞类似产品::A172细胞、ZR-75-30细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞
H1048细胞类似产品::IGROV1细胞、HT55细胞、NL20细胞
EU-4细胞类似产品::FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
GES-1:人胃黏膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
b.End3细胞类似产品::Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞
T8细胞类似产品::Lu-65细胞、SK-SH-SY5Y细胞、RCC23细胞
RPMI7666细胞类似产品::MFD-1细胞、EFM192C细胞、Panc_05_04细胞
FM-88细胞类似产品::KM H-2细胞、MC26细胞、N1E115细胞
EU-2细胞类似产品::TE-11细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、NCI-H1404细胞
XuanWei Lung Cancer-05细胞类似产品::GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞
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