"HaCaT:人永生化表皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
A2780-CP细胞类似产品::Hs 578.T细胞、NG10815细胞、KM-H2细胞
D324细胞类似产品::IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
Tu-212细胞类似产品::SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞
SKCO-1细胞类似产品::FAT细胞、EU-3细胞、293GP细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。
HaCaT:人永生化表皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
MCF10A细胞类似产品::NCI-H647细胞、GP5d细胞、CV-1.K细胞
NIH:OVCAR4细胞类似产品::Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞
HS852.T细胞类似产品::HEL-299细胞、NCIH1915细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
HaCaT:人永生化表皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中Zui核心、Zui基础的技术。公司是国内Zui大的细胞库之一,迄今为止,细胞收录背景资料清晰,活力状态良HAO的细胞系达1356株,其中大部分是1999年以来从美国ATCC、德国DSMZ和日本RIKEN等分批次引进的细胞系,是全国Zui权威的细胞库,为您实验提供Zui可信赖的细胞。公司立足上海,辐射全国,面向世界,为国内科研细胞实验做绵薄之力。
GM05372细胞类似产品::J 774A.1细胞、HF-91细胞、FaDu细胞
JiyoyeP-2003细胞类似产品::UCLA SO M14细胞、B5537SKIN细胞、Panc813细胞
G401细胞类似产品::PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞
PLC/PRF5细胞类似产品::KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
190PT细胞类似产品::Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞
ARO细胞类似产品::2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞
HCT15细胞类似产品::P-3J细胞、HuT 102细胞、OVCAR 8细胞
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Ca 9-22细胞类似产品::Caco-2 BBe细胞、CHL细胞、CHP212细胞
16HBEo-细胞类似产品::NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞
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HCC94细胞类似产品::HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞
CBRH-7919细胞类似产品::MH-S细胞、J774A.1细胞、BT20细胞
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Bac 1.2F5细胞类似产品::130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
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MOLM-16细胞类似产品::McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
HaCaT:人永生化表皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
H8细胞类似产品::SNU-354细胞、HCC-78细胞、Jurkat Clone E6-1细胞
Ly19细胞类似产品::CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞
Hs888 Lu细胞类似产品::NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞
Roswell Park Memorial Institute 1788细胞类似产品::EM3细胞、SGC7901/DDP细胞、C3H10T1/2细胞
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Dx5细胞类似产品::NCI-UMC-11细胞、Saos2细胞、GT39细胞
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