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RNA-蛋白质相互作用在细胞中具有重要作用，包括结构、催化和调节功能。RNA免疫沉淀（RNA Immunoprecipitation，RIP）是一种强大的方法，用于研究体内单个蛋白质和RNA分子之间的相互作用。RIP的基本原理与染色质免疫沉淀（ChIP）非常相似，这种方法基于使用针对感兴趣蛋白质的特异性抗体来拉下RNA结合蛋白（RBP）和目标RNA复合物。富集蛋白复合RNA后进行qPCR或下一代测序，为研究表观转录组范围内的蛋白-RNA相互作用提供了一种有利的工具。

传统的RNA免疫沉淀（RIP）高分辨低，且需要交联，并且存在重复性差和过程复杂的问题，特别是，耗时较长，且成本较高。为了解决这些问题，EpigenTek开发了一种新的检测方法，即EpiNext CUT&LUNCH RNA免疫沉淀（RIP）试剂盒，用于研究体内蛋白-RNA相互作用，它整合了目前使用的RIP和CUT&RUN的所有优势。

艾美捷EpiNext CUT&LUNCH RNA Immunoprecipitation (RIP) Kit RNA-蛋白免疫共沉淀试剂盒（#P-2037）检测原理：

试剂盒提供了所有必要的试剂，以富集特定RNA结合蛋白的RNA复合物，从而能够通过qRT-PCR或NGS分析各种细胞样本中的蛋白-RNA相互作用。在这个检测中，细胞被渗透处理，并用针对感兴趣蛋白的RIP级抗体处理。然后，一种独特的核酸切割酶混合物选择性地切割目标蛋白区域周围的RNA序列，移除非特异性的RNA-蛋白复合物。只有抗体结合的复合物被选择性保留。捕获的蛋白/RNA复合物中的RNA片段被纯化，可以直接用于qRT-PCR或cDNA库构建，以分析蛋白质与RNA之间的相互作用。

结果示例：

使用EpiNext CUT&LUNCH RNA免疫沉淀（RIP）试剂盒进行目标蛋白/RNA富集：从200,000个MCF-7细胞中，使用阳性对照抗体捕获了SNRNP70/RNA复合物。非免疫IgG用作阴性对照。富集的RNA被纯化，并通过Qubit进行荧光定量。

EpiNext CUT&LUNCH RIP Kit RNA保存建议：

分两部分运输：第1部分在室温下运输，第2部分在 4°C的冰冻冰袋。

收到后，根据上表中的温度避光储存组件。

注：检查WB（清洗缓冲液）和PB（透化缓冲液）之前是否含有盐沉淀 使用. 如果是这样，在室温或37°C下短暂加热并振摇，直至盐重新溶解。

CUT&LUNCH RIP 试剂盒的所有组分在适当储存条件下，自装运之日起可稳定储存6个月。

https://www.amyjet.com/products/P-2037-24.shtml