MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务。

C12-NBD-ceramide

MCE 国际站：C12-NBD-ceramide

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-141575

CAS：202850-01-9

存储条件：请将产品存放在分析证书上推荐的条件下。

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：C12-NBD-ceramide 是荧光神经酰胺类似物，可以作为底物用于神经酰胺酶实验中。

生物活性：C12-NBD-ceramide 是神经酰胺的荧光类似物，可用作神经酰胺酶测定的底物^[1][2]。 In Vitro: Guidelines（以下是我们推荐的方案。此方案仅提供一个指南，应根据您的具体需要进行修改）。
在本实验中， C12-NBD-神经酰胺用作荧光 nCDase 底物，反应产物将通过反相 HPLC^[2] 分离：
1. 20 μM 底物，1 nM nCDase 溶于 75 mM NaCl 、25 mM HEPES (pH 8.0) 和 0.4% Triton X-100，在 37°C 下 2 小时，最终体积为 100 μL。
2. 用 1:1 氯仿-甲醇提取样品，在氮气下干燥, 并重悬于 60 μL HPLC 流动相 B。使用 Spectra 3 μm C8SR 柱（3 μm 颗粒，3.0 × 150 mm）通过反相 HPLC 分离反应产物。
3. 流动相 A 含有 0.2% 甲酸酸和 1 mM 甲酸铵溶于 HPLC 级水中。流动相 B 在 HPLC 级甲醇中含有 0.2% 甲酸 (IL) 和 1 mM 甲酸铵。
4. 基于 FRET 的测定使用 20 μM 底物 ES.173.cds、50 ng nCDase、75 mM NaCl、 15 mM 磷酸钠 (pH 7.4) 和 0.3% Triton X-100 在 96 黑色孔板中处理 3 小时。
5. 测量试卤灵荧光（Ex=347 nm，Em=430 和 530 nm）。

体外：指南（以下是我们推荐的方案。该方案仅提供指南，应根据您的具体需求进行修改）。 在本实验中，C12-NBD-神经酰胺用作荧光 nCDase 底物，反应产物将通过反相 HPLC 分离[2]： 1. 20 μM 底物，1 nM nCDase 在 75 mM NaCl、25 mM HEPES（pH 8.0）和 0.4% Triton X-100 中，在 37°C 下反应 2 小时，最终体积为 100 μL。 2. 用 1:1 的氯仿-甲醇提取样品，在氮气下干燥，并重新悬浮在 60 μL HPLC 流动相 B 中。使用 Spectra 3 μm C8SR 柱（3 μm 颗粒，3.0 × 150 mm）通过反相 HPLC 分离反应产物。 3. 流动相 A 含有 0.2% 甲酸和 1 mM 甲酸铵，溶于 HPLC 级水中。流动相 B 含有 0.2% 甲酸 (IL) 和 1 mM 甲酸铵，溶于 HPLC 级甲醇中。4. 基于 FRET 的测定，使用 20 μM 底物 ES.173.cds、50 ng nCDase、75 mM NaCl、15 mM 磷酸钠 (pH 7.4) 和 0.3% Triton X-100 在 96 孔黑板中反应 3 小时。5. 测量试卤灵荧光 (Ex=347 nm、Em=430 和 530 nm)。MCE 尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

Emission (Em)：538

Excitation (Ex)：460

热销产品：Voclosporin  | Abscisic acid  | Pachymic acid  | Ticagrelor  | JH-RE-06

Trending products：Recombinant Proteins  |   Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |   Oligonucleotides

参考文献：

[1]. Tani M, et al. Specific and sensitive assay for alkaline and neutral ceramidases involving C12-NBD-ceramide. J Biochem. 1999 Apr;125(4):746-9.
[2]. Otsuka Y, et al. Identification of Small-Molecule Inhibitors of Neutral Ceramidase (nCDase) via Target-Based High-Throughput Screening. SLAS Discov. 2021 Jan;26(1):113-121.