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发布人:爱必信(上海)生物科技有限公司
发布日期:2026/6/29 21:48:32
做蛋白表达的科研人,谁没被传统原核表达折腾过? 构建载体、转化感受态、摇菌培养、诱导过夜,一套流程走完动辄 3-7 天;AI 批量设计上百条突变序列,逐个体内验证周期遥遥无期;毒性蛋白、膜蛋白在活菌系统里极易表达失败、产量低迷;想要小量快速筛变体,大批量培养既费耗材又耗人力…… 这些研发卡点,如今靠爱必信大肠杆菌无细胞蛋白合成试剂盒有望一键解决。
传统蛋白表达流程
一、跳出活菌束缚,重新定义蛋白表达速度
什么是无细胞蛋白合成?
无细胞蛋白合成脱离活细胞培养,把细胞裂解,去除细胞膜、基因组冗余结构,保留转录 + 翻译全套分子机器,反应体系额外添加氨基酸、NTP 原料、ATP 能量再生系统、缓冲盐等,客户仅需额外添加模板即可体外合成目的蛋白,即可实现蛋白表达。

无细胞蛋白表达示意图
无细胞蛋白表达系统有哪些优点?
1. 极速出样,大幅压缩实验周期 模板加入体系后1-2 h 即可检测到目的蛋白,8-24 h 达到表达峰值,无需等待菌体生长、诱导培养。AI 蛋白突变库、酶变体高通量筛选,单日完成上百条序列验证,干湿实验同步推进,不再让算法设计等湿实验验证。
2. 超高表达产量,最高可达 3 mg/mL 体系内置优化核糖体、全套翻译因子与能量再生系统,底物氨基酸、核苷酸配比精准,普通蛋白表达量远超常规 pET 菌体诱导体系,微量反应也能收获足量蛋白用于 SDS-PAGE、活性检测。
3. 体系灵活开放,适配多元实验需求 无需繁琐菌体操作,50 μL、100 μL 微型体系即可反应,兼容离心管、96 孔板,轻松实现高通量平行筛选;支持质粒、PCR 线性产物、RCA 滚环扩增产物三类模板,无需纯化的 PCR 片段可直接上样,大幅简化模板制备流程。
二、一站式预制体系,新手也能零门槛上手
很多无细胞试剂盒组分繁杂、配制门槛高,abs500014 采用双组分预混液设计,操作极简,全程冰上配制即可:
核心组分仅 Cell-free system solution A、B,固定体积配比 1:2,按体系体积定量添加,无复杂试剂配比计算;
试剂盒自带sf-GFP 阳性质粒(pJL1-sfGFP),反应成功后肉眼可见绿色荧光,酶标仪 485/528 nm 可精准定量,快速判断体系活性,排除操作失误;
模板兼容范围广:适配所有带 T7 启动子、无 lac 操纵子的 pET 系列载体(pET9a、pET23a 等),规避 lac 操纵子导致的产量下降问题;线性 PCR 产物上下游预留 200 bp 保护序列,抵御核酸外切酶降解,模板稳定性更强。

阳性质粒示意图
模板制备多元选择,适配不同科研场景
1. 质粒模板:柱纯化高纯度质粒,无 RNase 污染,直接投入反应;
2. PCR 产物:扩增后无需纯化直接使用,搭配 absin HiFi 高保真酶,快速批量构建线性模板;
3. RCA 滚环扩增产物:phi29 聚合酶扩增产物直接反应,适配高通量基因筛选;
4. 可与 Golden Gate、Gibson 无缝克隆联用,实现基因组装 + 无细胞表达一体化,大幅提升通量。
三、多场景全覆盖,适配全领域蛋白研发需求
1. AI 蛋白 / 抗体高通量筛选 AI 一次性输出数百条突变序列、纳米抗体、scFv 片段,传统菌体表达逐一验证耗时数月;使用无细胞蛋白表达试剂盒,微孔板平行反应,24 h 内完成全部变体表达与活性初筛,快速锁定优势候选分子,打通 AI 设计与实验验证闭环。
2. 毒性蛋白、膜蛋白快速表达 对宿主细胞存在杀伤性的抗菌肽、细胞毒素、跨膜靶点蛋白,在活细菌中极易抑制菌体生长、表达量极低;无细胞体系无细胞存活限制,可稳定合成各类难表达蛋白,还可按需添加去垢剂、辅因子优化膜蛋白可溶性。
3. 酶工程与合成生物学研究 突变酶文库筛选、体外酶动力学测试、转录翻译机制基础研究,开放体系可自由调控温度、底物浓度、氧化还原环境;25-30℃灵活控温,低温提升蛋白可溶性,高温加快合成速率,按需调整反应时长。
4. 小量快速蛋白制备 基因功能预实验、蛋白结构初步验证、标记蛋白微量合成,无需大规模摇菌,50 μL 小体系即可产出足量蛋白,节省培养基、耗材与培养设备,降低实验成本。
多款无细胞蛋白合成试剂盒
蛋白纯化试剂盒
电泳检测
Absin产品线:
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