NEK7（NIMA相关激酶7）是一个极具潜力的、用于治疗炎症性疾病和癌症的药物靶点。它的核心价值在于，它同时参与了细胞周期的调控和炎症反应，这使其成为一个多功能的治疗靶点. 一、 作用机制 NEK7在人体内主要有两大功能： 细胞分裂：作为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，NEK7在细胞有丝分裂过程中对纺锤体的形成和胞质分裂至关重要。 炎症激活：这是NEK7作为药物靶点的核心机制。它是关键炎症复合体——NLRP3炎症小体激活所必需的“辅助因子”。当NEK7与NLRP3结合后，会促使炎症小体组装，进而产生IL-1β和IL-18等炎症因子，并诱导细胞焦亡。
图：NEK7-NLRP3的相互作用和NLRP3炎症小体的组装与活化 From：Chen L, Liu Y, Yue S, et al. P2X7R Modulates NEK7-NLRP3 Interaction to Exacerbate Experimental Autoimmune Prostatitis via GSDMD-mediated Prostate Epithelial Cell Pyroptosis. Int J Biol Sci. 2024;20(9):3393-3411. Published 2024 Jun 11. doi:10.7150/ijbs.94704 NEK7的异常激活与多种疾病的发生发展密切相关，主要包括： 炎症性疾病：通过激活NLRP3炎症小体，NEK7与2型糖尿病、终末期肾病相关的心血管疾病、痛风性关节炎和败血症引起的心肌病等密切相关。 恶性肿瘤：NEK7表达失调与多种癌症的进展有关，如肺癌、结直肠癌、乳腺癌和胰腺癌，使其成为抗癌药物开发的潜在靶点。 目前，全球尚无靶向NEK7的药物获批上市，但已有多种策略处于活跃的临床前研究阶段： 一种曾进入III期临床试验的EGFR-TKI抗癌药，后被重新定位为NEK7抑制剂。它能与NEK7共价结合，阻断其与NLRP3的相互作用，抑制NEK7的激酶活性（功能丧失）。
一种新型的分子胶降解剂。它能诱导NEK7蛋白被降解，完全清除NEK7蛋白（既有功能丧失，也阻断骨架功能）。
Cycloartane-3.beta., 25-diol，Beta-Sitosterol
通过计算机虚拟筛选从植物中发现的多种天然化合物，显示出与NEK7的强效结合能力，是开发新一代抑制剂的先导化合物。
二 、 NEK7 研究相关检测 （ 一 ） 蛋白水平检测 1、UniOne® TR-FRET Human NEK7 / NLRP3 Binding检测试剂盒 试剂盒采用均相时间分辨荧光技术（TR-FRET），用于测定 NEK7 与 NLRP3 之间的相互作用。该方法可以实现简单快速的高通量鉴定抑制剂和抗体阻断剂。 如图所示，NEK7 与 NLRP3 之间的相互作用是通过使用 Eu 标记的抗 Tag1 抗体（TR-FRET 供体）和 Accepter 标记的抗 Tag2 抗体（TR-FRET受体）检测的。由于NEK7 与 NLRP3结合介导供体抗体与受体抗体接近，供体抗体的激发会触发向受体抗体的荧光共振能量转移（FRET），使受体抗体特异性发射665nm波长的信号。该特定信号与 IL6 与 IL6R 相互作用的程度成正比。该均相实验操作简单，无需洗涤步骤。 TR-FRET检测技术特异性好，灵敏度高，重复性好，通量高，操作简单，手动15min即可完成实验。
图：UniOne® TR-FRET Human NEK7/NLRP3 Binding检测原理 2 、UniOne® TR-FRET Human NEK7/CRBN PROTAC Binding检测试剂盒 试剂盒基于均相时间分辨荧光技术（TR-FRET），用于评估DDB1/CRBN复合物与NEK7之间的分子介导相互作用。该方法提供了一种高通量、简便快速的手段，可检测能够介导DDB1/CRBN复合物与NEK7相互作用的小分子。 如下图所示，通过Eu标记的抗Tag1抗体（TR-FRET供体）和Ac标记的抗Tag2抗体（TR-FRET受体）检测了DDB1/CRBN与NEK7之间的相互作用。由于分子粘附剂NK7-902 diTFA介导了DDB1/CRBN与NEK7之间的相互作用，因此供体抗体与受体抗体处于紧密邻近状态。当激发供体抗体时，会引发能量向受体抗体的荧光共振能量转移（FRET），从而导致受体抗体在665 nm波长处发出特异性信号。该特异性信号的强度与NK7-902 diTFA、DDB1/CRBN及NEK7之间相互作用的程度成正比。 该均相检测方法操作简便，无需洗涤步骤。
图：UniOne® TR-FRET Human NEK7/CRBN PROTAC Binding检测原理
图：UniOne® TR-FRET Human NEK7/CRBN PROTAC Binding示例数据 （ 二 ）细胞因子检测（Biom arker 检测） THUNDER TR-FRET细胞因子检测 Human IL1β THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的IL1β 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与细胞上清中IL1β 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与IL1β 浓度成正比。 全程仅需2h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。 Mouse IL1β THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的mouse IL1β 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与样品中IL1β 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与IL1β 浓度成正比。全程仅需3h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。 Human IL18 THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的mouse IL1β 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与样品中IL1β 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与IL1β 浓度成正比。全程仅需3h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。 HICA 细胞因子检测 Human IL1β 试剂盒采用双抗体夹心的均相发光法进行hIL-1β浓度的检测。均相化学发光是基于供受体微球近距离传递能量发光的均相免疫分析方法。 它采用受体微球交联F结合物，供体微球交联链霉亲和素，F标记hIL-1β抗体1和生物素标记hIL-1β抗体2。两种标记抗体、受体微球与待测物混合孵育，形成双抗体夹心免疫复合物，再与供体微球交联形成发光复合物。当两种微球的间距小于200nm，经激发光照射后，供体微球产生单线态氧并扩散至受体微球，受体微球接受能量产生发射光。通过感光元件收集光信号，采用数学拟合计算待测物中hIL-1β的浓度。当待测物中不含hIL-1β时，无免疫复合物的形成，两种微球的间距大于200nm， 超出单线态氧的传递距离，则受体微球不产生发射光。 HICA检测适用于普通及复杂样本，如：细胞、血液、脑脊液等。每个检测仅需2μl样本量。HICA检测范围宽，灵敏度比肩MSD，操作简便，是高通量筛选的不二之选。 相关产品推荐 Human NEK7/CRBN PROTAC Binding Kit
TR-FRET 检测抗体（结合标签蛋白，binding试剂盒组分 ）
Europium-labeled Anti-6xHis
Acceptor-labeled Anti-Human IgG
HICA 检测抗体（结合标签蛋白，构建较长检测体系 ）
Anti-Mouse IgG Donor Beads
Anti-His Tag Acceptor Beads
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