亲和层析是重组蛋白纯化中的“王牌技术”，凭借其高选择性、高纯度和温和操作，成为实验室及工业级纯化不可或缺的利器。无论是His标签蛋白、GST融合蛋白，还是抗体类大分子，亲和层析都能实现快速、稳定的目标蛋白捕获。
那么，亲和层析实验到底如何开展？需要哪些关键试剂？
一套标准的His标签蛋白亲和纯化流程如下
步骤一：蛋白表达与裂解
在大肠杆菌或哺乳动物细胞中表达目标蛋白后，使用裂解缓冲液进行细胞裂解。常搭配超声或反复冻融，确保释放蛋白质。
步骤二：亲和结合
将裂解液加入Ni-NTA琼脂糖柱（或磁珠、预装柱），利用His标签与Ni²⁺之间的螯合作用，使目标蛋白特异性结合。
● 推荐试剂：UltraBio™ His-tag 纯化树脂、UltraBio™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠（TED-Ni）、Ni亲和层析预装柱（阿拉丁官网具有多规格可选）
步骤三：洗脱杂蛋白
洗涤缓冲液中加入低浓度咪唑（10–30 mM），去除非特异性结合蛋白，同时保留目标蛋白在柱上结合。
步骤四：蛋白洗脱
使用高浓度咪唑（250–500 mM）洗脱目标蛋白。可搭配pH调节及NaCl调控，提升纯化效率与蛋白活性。
● 推荐试剂：咪唑、Tris-盐酸缓冲液、氯化钠、甘油、DL-二硫苏糖醇DTT
步骤五：蛋白缓冲液置换 / 浓缩
经亲和洗脱后，目标蛋白可通过透析、离心浓缩或柱层析进行缓冲液更换，适应后续结构或功能实验。
阿拉丁®亲和层析产品优势
★ 完整亲和纯化体系
从亲和填料（Ni-NTA介质、Anti磁珠、预装柱）到高纯缓冲液组分（咪唑、Tris-盐酸缓冲液、甘油等），全流程覆盖，轻松实现纯化标准化。
★ 高纯稳定，适合多系统表达
阿拉丁试剂纯度高、蛋白兼容性强，适用于大肠杆菌、哺乳细胞、酵母等表达体系。
★ 多规格灵活选择
适配科研、药物开发与工艺优化所需，提供小包装到大包装填料规格，以及缓冲液等。
从表达到洗脱，从实验室到产业级，阿拉丁蛋白质纯化相关产品始终为您的分离之路保驾护航。
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