1、仔细阅读说明书。
2、确认试剂盒在有效期内。
3、按说明书确认一切试剂*（数量、体积）。
4、标本制备要标准，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（储存），尽量分装做备份。短期内无法试验者，注意低温保存。
5、准备好一切试验额定所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等。
6、依据检测标本数量确认所需试剂的量。
7、按说明书将所用试剂平衡至室温，制造所需试剂。
ELISA试验时，注意事项如下：
1.正式试验时，应别离以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证试验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反响，可采用羊血清、免血清或BSA等关
闭。
2.在ELISA中，进行各项试验条件的挑选是很重要的，其间包含：
(1）固相载体的挑选：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不论何种载
体，在运用前均可进行挑选：用等量抗原包被，在同一试验条件下进行反响，查询其显色反响是否均一性，据此判明其吸附性能是否出色。
（2）包被抗体（或抗原）的挑选：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有必定影响，一般多采用4℃18
~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相一同，查询阳性标本的OD值。挑选OD值大而蛋白量少的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1~10μg/ml。
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