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发布人:新维创生物科技(重庆)有限公司
发布日期:2026/2/10 14:36:15
Fluo-4(全称:Fluo-4 pentapotassium salt 或 Fluo-4 AM ester)是一种合成型小分子荧光染料,专为高灵敏度检测细胞内游离钙离子而开发。其母体结构源自荧光素衍生物,核心特征是在苯并吡喃酮环上引入了四个羧酸基团及一个酚羟基,形成对Ca²⁺特异性螯合的配位腔。
该探针的关键物理化学属性包括:水溶性差但AM酯形式脂溶性强,便于穿透细胞膜;与Ca²⁺结合后量子产率显著提升;Kd值约为345 nM,适合检测生理浓度范围内的钙波动(50–1000 nM)。其分子式为C₅₁H₄₆F₂N₂O₂₃(AM形式),分子量约1097.9 g/mol。
在实际科研应用中,Fluo-4常用于G蛋白偶联受体(GPCR)通路研究。例如,在药物开发中,当候选化合物激活受体引发IP₃生成并释放内质网钙库时,Fluo-4可即时捕捉这一荧光信号变化,实现功能性药效评估。此外,在神经元突触传递、T细胞受体激活及心肌收缩同步性研究中,Fluo-4配合高速成像系统可揭示毫秒级钙振荡模式。
值得注意的是,Fluo-4的开发代表了第二代钙探针的优化方向:相比早期Fura-2需紫外激发,Fluo-4兼容可见光激光器,减少细胞光毒性;相较于Indo-1需比率测量,Fluo-4单波长检测更简便,适合自动化平台。当前,已有多种改良版本如Fluo-4FF(低亲和力型)或Fluo-4NW(免洗型)推出,进一步拓展其在复杂生物体系中的适用边界。
综上,Fluo-4不仅是一项成熟试剂,更是连接分子识别与细胞功能可视化的重要桥梁。
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