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发布人:杭州斯达特生物科技有限公司
发布日期:2026/11/13 11:49:26
外泌体研究的坑,一半在提取,一半在鉴定。标志物对不上,后面的功能实验基本白做。CD9、CD63、CD81,你测了几个?
外泌体是由细胞分泌的纳米级膜性囊泡,广泛存在于血液、尿液、母乳和细胞培养基等生物体液中,携带复杂RNA和蛋白质组分,是细胞间通讯及物质传递的重要载体。外泌体研究涵盖提取、鉴定、功能研究及临床应用等多个环节,其中标志物鉴定是确认外泌体身份和纯度的关键步骤。
Exosome抗体套装通过整合多种外泌体标志物的特异性抗体,为外泌体的系统化鉴定和功能分析提供完整工具。
外泌体是指包含了复杂RNA(如mRNA、microRNA)和蛋白质的小膜泡,现今其特指直径在40-100 nm的盘状囊泡,广泛存在于血液、尿液、母乳和细胞培养基等生物体液中。
作为细胞间通讯及物质传递的重要载体,外泌体能调控靶细胞内多种信号通路,并根据来源母细胞类型及携带的蛋白质、不同种类的RNA等组分的差异发挥不同的生物学功能。外泌体与肿瘤转移、细胞通讯、免疫调节、细胞凋亡和自噬、细胞分化、组织再生与修复等密切相关。
从来源看,外泌体可从细胞培养液上清、菌液、血清/血浆、尿液、组织样本、盆腔冲洗液、肿瘤囊肿积液、关节冲洗液等多种样本中分离获得。不同来源的外泌体在组分和功能上存在差异,这一特征使其成为液体活检和疾病标志物研究的重要材料。
提取方法方面,超速离心法是外泌体提取最常用的方法,但需要冷冻超速离心机等硬件条件。该方法得到的Exosome量比较多,但是纯度往往不足,电镜时发现Exosome聚集成块,难以判定究竟是微囊泡还是外泌体。
试剂盒提取Exosome操作简单,获取的Exosome纯度与提取效率相对较高,因而受到大多数研究者的欢迎,尤其适合样本量较小的情况。
鉴定方法方面,外泌体提取后需要系统鉴定,通常包括三个层面。NTA粒径分析:纳米颗粒跟踪分析是对每个颗粒的布朗运动进行追踪,可检测10 nm-1000 nm范围内的颗粒,提供粒径分布和浓度信息。
透射电镜分析:分辨率可达0.1-0.2 nm,是外泌体双层囊膜超微结构观测的经典方法,可直观确认囊泡形态。
标志物鉴定:根据外泌体母细胞来源,优选外泌体标志物抗体,如CD9、CD63、CD81等,通过细胞流式检测以及Western Blot检测做进一步鉴定。
其中,标志物鉴定是确认外泌体身份和评估纯度的核心环节,也是抗体套装的主要应用场景。
外泌体携带mRNA、miRNA和蛋白质,这些活性物质一旦进入其它细胞,很有可能引起其它细胞功能上的变化。通过高通量测序RNA,可以筛选具有代表性的差异表达的miRNA;做蛋白组学分析,可以研究发现新的蛋白标签。
锁定目标分子、探究机制,一般是通过细胞实验研究其与某种信号通路相关因子的作用关系,然后再在动物体内实验进一步验证。通过检测对应疾病患者样本中目标分子的表达水平与疾病关系,整理和分析临床病理特征信息,进一步筛选出具有潜在早期筛查价值的疾病外泌体标志物。
总体而言,外泌体研究离不开以下步骤:外泌体提取;外泌体鉴定;外泌体功能研究;外泌体携带的分子功能研究;外泌体分子水平的动物实验;临床相关性研究。在这条完整的研究链条中,外泌体鉴定是承上启下的关键环节:只有确认了外泌体的身份和纯度,后续的功能研究和分子分析才具有可靠性。

图片来源:斯达特官网技术软文
在外泌体身份确认中,CD9、CD63、CD81等经典标志物抗体可用于Western Blot检测外泌体裂解液中的标志物表达,确认分离产物是否为外泌体。这些四跨膜蛋白家族成员在外泌体膜上富集,是国际公认的外泌体标志物。
在纯度评估中,通过检测外泌体标志物与细胞内质网、高尔基体等非外泌体标志物的相对富集程度,可评估分离产物的纯度。在流式分析中,偶联荧光染料的标志物抗体可用于外泌体表面标志物的检测,分析不同来源外泌体的表面分子谱。在组织分布分析中,免疫组化可用于评估外泌体标志物在组织中的表达分布。
单一标志物可能无法覆盖所有外泌体亚群,多标志物联合检测是提高鉴定可靠性的重要策略。
本篇表格 1 款:S0M1007 Exosome Antibody MiniAb Set,未标记,现货,¥3,400,整合CD9、CD63、CD81等经典标志物抗体,适配Western Blot、流式与免疫组化。
| 货号 | 产品名称 | 商品参数 | 参考货期 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|---|---|
| S0M1007 | Exosome Antibody MiniAb Set | 标记 : Unconjugated | 现货 | ¥3,400 |
数据来源:斯达特(Starter)官网产品页 S0M1007,信息检索时间2026-11-13
外泌体鉴定的难点不在技术,在标准。同一份样本,超速离心和试剂盒法拿到的囊泡,标志物谱就不一样。三个经典标志物联合看,比单打一个靠得住。你的阴性对照,用的是细胞裂解液吗?
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