给抗体做标记，还要基因改造、担心损伤抗原结合？
启和新品快速标记抗体试剂盒来了——酶促反应直接把叠氮基团精准连接到 IgG 的 Fc 区，无需繁琐的基因改造，不碰抗原结合位点；再通过无铜点击化学，轻松挂上荧光染料、生物素、寡核苷酸或药物分子。本试剂盒提供一种高效、位点特异性的抗体叠氮基修饰方案：利用酶促反应，将叠氮基团（–N₃）精准连接到 IgG 抗体上，不影响抗原结合能力，无需繁琐的基因改造，即可制备可用于后续标记的抗体。
修饰产物可通过无铜点击化学与 DBCO / sDIBO 探针偶联，灵活连接荧光染料、生物素、寡核苷酸等，广泛应用于 ADC、抗体功能研究、细胞成像、流式细胞术等多种生物学实验。
小提示：试剂盒适配大部分 IgG，标记效果受抗体物种与亚型影响，采购前可与我们确认目标抗体状态。
通过酶促反应将叠氮基团精准连接到 IgG 抗体 Fc 区，确保抗原结合区域不受影响，维持抗体功能。提供高效、位点特异性的标记，批次间标记程度一致性高，结果可重现。适配大部分 IgG 类型，标记效果受抗体物种、亚型影响，可提前评估适配性。叠氮基修饰后的抗体可与多种炔烃标记物（荧光染料、生物素、寡核苷酸、药物等）通过无铜点击化学偶联，满足多样化实验需求。无铜点击化学反应可在温和条件下进行，最大限度地减少对敏感抗体的损伤。以 500 μg 规格为例：
储存条件：组分 A、B、C 均于 -20 °C 保存，组分 B、C 需避光，避免反复冻融。
● 治疗性抗体开发 —— 制备具有特定标记的治疗性抗体，便于追踪、成像或功能研究● ADC 药物制备 —— 药物分子在抗体上精准偶联，提高 ADC 的稳定性和靶向性● 免疫诊断试剂开发 —— 助力开发高特异性、高灵敏度的免疫诊断试剂● 基础研究 —— 抗体功能研究、细胞成像、流式细胞术等多种生物学实验前置试剂清单：磷酸盐缓冲液（pH 7.4）、G25 脱盐柱 / 填料（或 Protein A 纯化）、37 °C 恒温震荡设备。标准方案以标记 0.5 mg 抗体（初始浓度 10 mg/mL，体积 50 μL）为例。试剂与样品准备
① 抗体样品：用磷酸盐缓冲液调整浓度，建议反应初始浓度 ≥ 10 mg/mL；若处于其他不兼容缓冲液，建议预先透析；
② 组分 A（酶液）：恢复室温，离心防止挂壁损失；
③ 组分 B（底物母液）：恢复室温后加入 10 μL PBS 溶解，现配现用；
④ 组分 C（荧光染料）：加入 2~10 μL 无水 DMSO 充分溶解。反应管中依序加入抗体 50 μL → 组分 A 2 μL → 组分 B 母液 10 μL，37 °C 恒温震荡孵育 1~2 小时；G25 填料去除多余底物，纯化出叠氮修饰抗体。向纯化后的叠氮化抗体溶液中加入过量充分溶解的组分 C（AF594-DBCO），室温（25 °C）避光孵育 1~2 小时或过夜；DBCO 与新引入的叠氮基团发生高特异性环加成反应，抗体与染料比例可调。反应结束后使用 LH-20 纯化（或 Protein A 纯化）去除多余游离染料，标记抗体即刻可用。以 CD3E（OKT3）抗体流式测试验证：标记后抗体荧光信号分群明显、区分度清晰——
▶【图1】流式直方图：CD3 阳性峰（P6）占 69.85%，阴性峰（P7）占 27.24%，荧光信号分群明显，验证修饰后抗体具备优异抗原结合活性，可稳定用于流式细胞检测。▶【图2】流式散点图：CD3 阳性细胞群（P4）占比 70.39%，阴性细胞群（P5）占 27.58%，目标抗体标记区分度清晰。注：具体货号和包装规格可根据实际情况调整，其他规格可联系定制。
*特殊规格可定制
● 科研专用：本产品仅供科研使用，不可用于诊断程序● 规范操作：请严格按照说明书操作，确保实验结果准确、可重现不影响。BSA 的存在不会抑制组分 B 的标记效率；但高浓度外源蛋白可能竞争反应底物，降低抗体标记效率，建议留意配方。叠氮基团可与任意炔烃（铜介导点击反应）或任意 DIBO / sDIBO 炔烃（无铜点击反应）反应。我们强烈建议使用 sDIBO 炔烃，以限制抗体的非特异性结合。不建议。本试剂盒专门针对大部分 IgG 抗体 Fc 位点标记优化，不适用于其他蛋白。不能全部。试剂盒仅识别 IgG Fc 区部分结构，若抗体经过改造、或物种 / 亚型自身 Fc 端改变，标记效率可能降低甚至完全无信号；采购前可提前评估目标抗体状态。 
