新维创科普 | 烟酸-CY7 里烟酸那么小，换成 CY7 还有什么意义？

从烟酸-FITC 换到烟酸-CY7，下意识的反应往往是：烟酸本来就只有几个原子，染料反而占了大半，那这个分子到底还算不算烟酸的探针？这个疑问合理，答案也直白：染料换到近红外，换的是“能不能看见”和“在哪儿看得见”，不是换掉烟酸本身。烟酸的两性结构还在，只是信号被搬到了另一个窗口。下面说说这个换法带来了什么。

一、烟酸为什么值得标？

烟酸的骨架是吡啶环，3 位挂一个羧基。这个组合在化学上很有意思：吡啶氮能接受质子，羧基能给出质子。

在接近中性的水相里，它以一种两性离子状态存在——氮带正电、羧基带负电，整体净电荷接近零。这个状态让它既溶于水，又不像纯阴离子那样容易被带正电的表面吸走。

这种“两头都不极端”的性质，是小分子示踪里比较难得的。换成 CY7 之后，这部分特征并没有丢，因为标记位点的选择可以避开它。

二、CY7 换掉的是窗口

CY7 是七甲川花菁染料，吸收约 750 nm、发射约 775 nm，落在近红外区。

这一段的好处是背景低。样本自身的自发荧光在可见区很热闹，到这个波段已经弱下去了。所以对厚一些的样本，近红外的信号能穿出来，可见区的信号往往被吸收和散射吃掉。

代价也要说清。CY7 的波长更长，单位浓度的信号强度通常略低于 CY5.5；同时它对设备有要求，需要匹配近红外波段的激发光源与滤光片，普通可见区配置读不到。

所以“换 CY7 值不值”，很大程度上取决于你手上有什么设备，以及样本有多厚。

三、羧基和吡啶氮

偶联有两条路，选哪条会改变分子性格。

走羧基：做成活性酯后与带氨基的连接臂成酰胺键。路线可控，产物单一，但羧基被消耗掉，两性离子状态就破了，分子整体开始偏正。

走吡啶氮：做成 N-烷基化产物再接染料。羧基保留下来，代价是环上带了恒定正电荷，水相行为与原始分子差别更大，跑色谱时保留时间会明显前移。

两条路线得到的光谱几乎一样，靠光谱区分不出来。所以做对照的时候，不能只比荧光亮度，还得比分配行为——比如在两相体系里的分布比，或者色谱保留时间。

四、近红外的多色方案怎么排？

CY7 在通道序列的远端，位置比较省心。

常见的搭配是绿通道给 FITC 或类似染料，橙红给 CY3，红给罗丹明，远红给 CY5 或 CY5.5，CY7 收在末尾。这样五色排下来，彼此的间隔还算够。

要留意的是 CY5.5 和 CY7 的位置比较近。两者的发射有部分重叠，如果一定要同时用，得做单色对照把补偿算清楚。多数情况下，这两个里挑一个就够。

五、它在水里为什么好溶？

这是两性离子带来的直接结果。净电荷接近零，分子之间不容易靠静电抱团，水合层也稳定，所以不需要高比例的有机助溶剂。

真要配高浓度母液，还是建议先用少量 DMSO 溶开，再逐滴加进缓冲液，边加边混。一次性把浓溶液倒进大量水相，局部过饱和很容易析出，尤其是 CY7 这类带长共轭链的染料。

配好之后避光、低温保存。CY7 对光比较敏感，操作尽量在弱光下做，别放在台面上照一下午。

想更系统地了解它的结构与配制方法，可前往新维创生物官网查看对应技术文章与产品页。

本产品仅供科研使用，禁止用于任何人体实验。

点击链接，查看产品详情：烟酸-CY7