试用申请｜Hybriboost 促杂交瘤细胞生长剂：化学成分限定，提升克隆效率

摘要：Hybriboost 现开放试用申请！促杂交瘤细胞生长剂适用于 HAT 筛选、单克隆化及常规培养阶段，可提升融合后集落数量与单克隆化成功率，且不影响抗体分泌。

关键词：杂交瘤细胞、杂交瘤细胞培养、HAT 筛选、单克隆抗体、集落形成率、杂交瘤细胞培养基、饲养层培养基、细胞生长补剂、杂交瘤细胞融合、Hybriboost 试用

杂交瘤技术是制备单克隆抗体的常用方法。从 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，到获得一株能稳定分泌目标抗体的单克隆细胞，中间要经过 HAT 筛选和单克隆化两步。这两个阶段也是实验中容易出问题的环节：新融合的杂交瘤细胞状态不稳定，对培养环境敏感，在筛选压力下存活率低，一些潜在的阳性克隆可能还没长出来就丢失了。

为帮助杂交瘤细胞顺利度过这两个阶段，Hybriboost 促杂交瘤细胞生长剂，专为杂交瘤细胞培养而设计，能提升杂交瘤细胞的克隆效率和存活率，确保培养过程安全稳定。

一、Hybriboost 是什么

Hybriboost（货号 HM-01）是一种专门用于杂交瘤细胞培养的补剂，所含成分和浓度明确，无动物来源成分、无血清、无蛋白。它为杂交瘤细胞提供生长支持，帮助细胞在筛选和单克隆化阶段存活、增殖。

二、适用阶段

1. 筛选阶段：添加到 HAT 培养基中，帮助细胞在筛选压力下存活。

2. 单克隆化阶段：维持单细胞克隆的生长，提高单个细胞长成集落的概率。

3. 日常培养：作为常规补剂，用于已建立的杂交瘤细胞培养与抗体制备。

三、产品特点与验证数据

（一）有助于提高融合后的克隆形成

将新融合的 PEG 杂交瘤细胞接种到 96 孔板，分别在三种培养基中培养：含 Hybriboost 的 FCS 培养基、含饲养层的 FCS 培养基、常规 FCS 培养基。融合后第 14 天，计数每块 96 孔板中的杂交瘤集落数。实验使用 NS-1 和 SP2/0 两种骨髓瘤融合伴侣，各进行 4 次独立融合。

结果显示，无论 NS-1 还是 SP2/0，Hybriboost 组形成的集落数均高于另外两组。以 NS-1 为例，Hybriboost 组每次实验每块板约 900–1500 个集落，饲养层组约 130–250 个，常规 FCS 组约 70–120 个。

图 1. 三种培养基中杂交瘤融合后的集落数（NS-1、SP2/0，4 次实验）

（二）有助于提高单克隆化成功率

对单克隆化培养的孔，在显微镜下目视计数其中有集落生长的孔，统计长出集落的孔所占比例。

结果显示，Hybriboost 组在 NS-1 上长出集落的孔占比约 90%–96%，SP2/0 约 66%–89%；饲养层组约 34%–78%，常规 FCS 组多在 45%以下。Hybriboost 组的单克隆化成功率高于另外两组。

需要说明的是，该指标统计的是出现集落的孔所占比例，并不等同于阳性克隆率。

图 2. 三种培养基中杂交瘤的单克隆化成功率（NS-1、SP2/0，4 次实验）

（三）化学成分限定，抗体分泌水平相当

选择杂交瘤细胞克隆（抗人转铁蛋白，L3B5），在三种培养基中培养 7 天，取上清用 ELISA 测定抗体效价（A410）。

结果显示，三种培养基中细胞的抗体分泌量随时间的变化趋势一致，第 7 天的 A410 读数接近。验证实验中未观察到 Hybriboost 对抗体分泌的明显影响。

图 3. 三种培养基中杂交瘤细胞的抗体分泌量（ELISA，A410，7 天）

以上数据来自研发方的验证实验，实际表现可能因细胞株、培养基配方与操作条件不同而存在差异。

四、规格与使用配制

本次申请发放规格与以实际发放为准。

配制方法（以 50 mg 为例，两种方法任选其一）：

方法一：用 5 mL 双蒸水溶解粉末，与 1 L 培养基混匀，经 0.22 μm 滤器过滤后使用。

方法二：用 1 mL 双蒸水溶解，先经 0.22 μm 滤器过滤，再与已过滤的 1 L 培养基混匀。

五、试用建议

试用装容量有限，建议集中在一个环节做对照，避免两段同时铺开。

同批融合细胞、同批血清、同日铺板，只改变培养基补充剂这一项。

记录三个指标：每板集落数、出现集落的孔所占比例、后续单克隆阳性率。

六、试用申请

现开放试用申请。申请入口：Hybriboost 免费试用申请（点击填写），您也可扫描下方二维码进行信息登记。

试用装数量有限，赠完即止。需要的小伙伴请填写相关信息！我们会安排专人与您联系，为您尽快安排试用。