骨吸收标志物测不准？CTXⅡ ELISA Kit夹心法定量

1. 小鼠CTXⅡ为何是骨代谢研究的核心指标？

Ⅱ型胶原交联羧基端肽（CTXⅡ）是纤维状胶原C端端肽的降解片段，属成熟胶原纤维的降解产物。关节软骨与生长板基质以Ⅱ型胶原为主，软骨降解时释放CTXⅡ入血，因此血清CTXⅡ可作为软骨降解速率与骨/软骨周转的生物标志物，常用于骨关节炎、类风湿关节炎模型及软骨代谢研究；CTX家族中的β-CTX入血后不被降解、由肾脏排出，也是常用的骨周转读数。货号abs5520380的Mouse CTXⅡ ELISA KIT以小鼠CTXⅡ为靶标，适用于血清、血浆和其他生物液体。

2. Mouse CTXⅡ ELISA KIT的双抗体夹心法原理是什么？

该试剂盒采用双抗体夹心法。微孔预先包被小鼠CTXⅡ捕获抗体，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体与HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤；加入底物TMB后，TMB在过氧化物酶催化下转化成蓝色，在酸的作用下转化成最终的黄色，颜色深浅与样本中小鼠CTXⅡ呈正相关，于450nm波长测定吸光度并计算样本浓度。试剂盒中浓缩生物素化检测抗体（100×）与浓缩酶结合物（100×）均需按说明书稀释后使用。

3. 小鼠血清与血浆样本前处理怎么做？

血清：全血标本在无热源试管中采集，室温放置或4℃过夜后离心取上清。血浆：推荐EDTA抗凝，采集后30分钟内低温离心取上清，避免使用溶血与高血脂样品，因红细胞裂解释放的成分会带来非特异显色。样本应清澈透明，出现沉淀须再次离心后取上清检测。长期保存建议分装于-20℃或-80℃并避免反复冻融；检测前所有试剂需恢复至室温并混匀。试剂盒开封前有效期6个月，开封后需在1个月内使用完毕。

4. Mouse CTXⅡ ELISA KIT检测范围与灵敏度如何解读？

该试剂盒检测范围15.6-1000 pg/mL，灵敏度7.3 pg/mL，规格96T（8孔×12条）。操作上按说明书稀释标准品并建立标准曲线，标准品孔与样本孔依次加样后温育、洗板，加入底物TMB显色，以终止液终止反应并在450nm读数，由标准曲线反算样本浓度。需注意CTX是纤维状胶原（如Ⅰ型与Ⅱ型胶原）C端端肽的统称，血清CTXⅡ读数会受模型类型、造模周期与采样时点影响，建议同批次设置对照并与组织学指标互相印证。试剂盒2-8℃保存。

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