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选血清别只看等级!实验踩坑,可能是血清里的"小分子"在捣乱

发布人:武汉普诺赛生命科技有限公司

发布日期:2026/10/26 14:11:55

血清是细胞培养体系中最基础、使用最广泛的添加组分。在常规细胞培养中,我们通常会从供体牛生长阶段、血源产地、产品等级和批次稳定性等维度选择血清产品。但当研究深入到代谢示踪、激素调控、细胞外囊泡等方向,而非简单的养好细胞时,血清本身携带的部分成分也可能成为实验变量。这时,除了关注血清的基础质量,还需要考虑哪些成分可能影响实验,以及是否需要针对性降低这些成分带来的背景干扰。

本期细胞学堂梳理三类常见功能性血清的处理原理、主要特点及适用场景,为不同实验体系下的血清选择提供参考。

一、血清的成分构成:营养之外还有潜在干扰

血清通常被视为细胞的营养来源,提供生长因子、激素、蛋白质等,维持细胞的生长与增殖。从实验研究的角度,可以将其中的主要成分粗略分为两类:

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图1. 血清主要成分及其分类


对大多数常规细胞培养而言,成分完整意味着营养全面,有利于细胞生长。但在特定实验体系中,这些小分子成分会成为干扰来源:

在这些情况下,血清成分完整反而成为实验的不确定因素。


二、功能性血清:让血清更匹配实验需求

功能性血清是指在标准胎牛血清基础上,通过特定工艺定向去除某些成分,使其适配某一类特定实验需求的血清。其核心目的不是提升血清品质,而是使血清与实验体系相匹配。功能性血清的价值,取决于它与实验需求的匹配程度,而非价格或等级。

目前主流的三种功能性胎牛血清,分别对应三类高频实验需求。

01.透析型胎牛血清:面向代谢研究与示踪实验

核心工艺:透析(Dialysis)。采用截留分子量(MWCO)约10 kDa的透析膜,将血清中分子量小于10 kDa的小分子去除,大分子成分完整保留。

去除的成分:葡萄糖、游离氨基酸、无机盐、小分子代谢物。

保留的成分:白蛋白、球蛋白等大分子蛋白,以及大部分生长因子。

适用场景:

  • 代谢研究与代谢组学:测定细胞内代谢物时,大幅降低血清中葡萄糖、氨基酸带来的背景噪音;

  • 同位素示踪:使用13C/14C标记底物进行追踪时,避免血清中未标记的同种分子稀释信号,保障示踪效果;

  • 细胞能量代谢检测(如 Seahorse):测定糖酵解与氧化磷酸化时,实现可控的糖浓度背景,排除额外变量;

  • 蛋白质组学与多肽组学:降低血清小分子对质谱检测的干扰;

  • 药物筛选:控制血清中游离小分子对药效评价的干扰。

02.碳吸附胎牛血清:面向激素敏感型实验

核心工艺:活性炭吸附。采用活性炭(通常配合葡聚糖)吸附血清中的小分子疏水物质,主要为各类类固醇激素。

去除的成分:雌二醇、睾酮、皮质醇、孕酮,甲状腺激素 T3、T4,以及部分小分子生长因子。

保留的成分:大分子蛋白、氨基酸、葡萄糖、无机盐等基础营养成分。

适用场景:

  • 激素受体研究:雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)相关信号通路研究;

  • 激素依赖性肿瘤细胞培养:乳腺癌(MCF-7、T47D 等ER+细胞)、前列腺癌细胞的培养体系;

  • 内分泌与类固醇研究:受体结合与调节、组织激素分泌、甲状腺功能研究;

  • 干细胞与原代细胞培养:避免血清激素批次间波动影响细胞分化方向;

  • 内分泌干扰物研究:评估环境化合物的激素样效应时,排除血清自带激素的背景干扰。

03.去外泌体胎牛血清:面向外泌体等细胞外囊泡研究

核心工艺:膜过滤、超速离心等。依据尺寸差异,将血清中天然的细胞外囊泡(30–150 nm)截留去除,小分子营养与活性蛋白予以保留。

去除的成分:血清中天然存在的牛源外泌体及其他细胞外囊泡(优质产品去除率可达 98%以上),以及牛源miRNA等由囊泡携带的生物活性分子。

保留的成分:支持细胞生长的营养物质,以及促进增殖的天然活性蛋白与生长因子。

适用场景:

  • 外泌体分离与鉴定:NTA 粒径分析、透射电镜、CD63/CD9/CD81标志物Western Blot;

  • 细胞外囊泡组学研究:外泌体蛋白质组、转录组、miRNA 测序,避免残留牛源 miRNA 会污染结果;

  • 细胞间通讯研究:囊泡是细胞间通讯的载体,外源囊泡会干扰真实效应的判断;

  • 干细胞与细胞治疗相关囊泡研究。


三、常见问题解答

Q1:三类功能性血清可以互相替代吗?

不能。三者针对的干扰来源不同:透析型去除小分子(尤其是葡萄糖与氨基酸);碳吸附型去除激素类小分子,但保留葡萄糖;去外泌体型去除囊泡颗粒。选错类型,无法解决对应的干扰问题,甚至可能引入新的变量。

Q2:常规细胞培养是否需要使用功能性血清?

非必需。若实验不涉及代谢、激素或外泌体研究,标准化胎牛血清即可满足需求。功能性血清属于针对性产品,适用于特定实验体系。

Q3:相关组分去除率越高越好吗?

功能性血清质量并非由单一指标决定。以去外泌体型为例,需要结合两方面数据判断:一是残留验证数据(NTA、CD63 等),二是细胞生长表现。仅关注去除率数值,容易与实际使用效果产生偏差。


血清选择的关键,不只是“质量够不够好”,更是“是否适合当前实验”。当研究从常规细胞培养走向代谢、激素调控或细胞外囊泡等特定方向时,针对性选择功能性血清,有助于减少不必要的背景干扰,让培养体系更加可控。

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