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细胞磁珠分选:到底阳性还是阴性?看你的下游实验

发布人:上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2026/10/22 12:21:49

细胞磁珠分选:到底阳性还是阴性?看你的下游实验

做免疫实验的小伙伴,难免会需要磁珠分选。然而,阳性分选、阴性分选、有柱、无柱…… 各种选项看得人眼花缭乱,选错了不仅实验结果跑偏,还浪费珍贵样本和时间。

其实分选策略的选择从来没有 “标准答案”,核心原则只有一个:根据你的下游实验需求来定。今天我们就把两种分选方式的原理、优劣、适用场景一次性讲透,附三步快速决策法,帮你精准选对方案。

货号 品名 分选策略
S0K0004 CD14 Nanobeads, human(RUO) 阳性分选
S0K0009 Dead Cell Removal Set, (RUO) 阳性分选
S0K0011 CD3 Nanobeads, human(RUO) 阳性分选
S0K0005 CD8 Nanobeads, mouse(RUO) 阳性分选
S0K0007 CD11b NanoBeads, human and mouse(RUO) 阳性分选
S0K0010 CD8 Nanobeads, human(RUO) 阳性分选
S0K1008 Mouse T Cell lsolation Kit (Column-Based) 去除分选
S0K1009 Human NK Cell Isolation Kit (Column-Based) 去除分选
S0K1005 Mouse CD4 T Cell lsolation Kit (Column-Based) 去除分选
S0K1007 Mouse CD8 T Cell lsolation Kit (Column-Based) 去除分选
S0K1001 Mouse Naive CD4 T Cell lsolation Kit (Column-Based) 去除分选
S0K1002 Mouse Naive CD8 T Cell lsolation Kit (Column-Based) 去除分选
S0K3006 Mouse T Cell lsolation Kit ( Column-Free) 无柱式去除分选
S0K3003 Mouse CD4 T Cell lsolation Kit (Column-Free) 无柱式去除分选
S0K3004 Mouse CD8 T Cell lsolation Kit (Column-Free) 无柱式去除分选
S0K0014 Mouse Naive CD4 T Cell lsolation Kit (Column-Free) 无柱式去除分选
S0K3005 Mouse Naive CD8 T Cell lsolation Kit (Column-Free) 无柱式去除分选

一、阳性分选(直径约 20nm)

原理

阳性分选是最直观的分选思路:用偶联特异性抗体的纳米磁珠直接标记目标细胞,通过磁场将磁珠结合的细胞吸附分离,最终被磁珠捕获的就是你想要的目的细胞。

阳性分选原理示意图

什么时候需要选择阳性分选?

二、阴性分选:去除所有杂质,还细胞天然状态

原理

阴性分选也叫 “去除分选”,思路和阳性分选正好相反:用多种抗体组成的 “磁珠鸡尾酒” 标记所有非目标细胞,再通过磁场将这些 “杂质细胞” 连同磁珠一起吸附去除,最终留在上清液中、未被任何标记的细胞就是目的细胞。

去除分选原理示意图

什么时候需要选择阴性分选(去除分选)?

三步快速决策法总结

进阶选型:有柱分选 vs 无柱分选

确定了阳选 / 阴选的大方向后,下一个问题就是选有柱分选还是无柱分选。这本质上是在纯度和回收率 / 细胞活性之间做取舍。如下是有柱分选和无柱分选的对比:

三步快速决策法总结

一句话速记: 要细胞本身→阳性;要干净背景→阴性;只想扔掉某类细胞→去除。 纯度不够先看柱,回收率不够看磁珠。纯度和回收率不可同时最优,先明确必须保住的核心指标。

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优点 缺点
纯度最高,通常可达 95%~99% 目标细胞表面被抗体占据,可能影响下游
操作步骤少、耗时短(15~30 min) 可能引起细胞激活(如 CD3/CD28 通路)
对杂质背景不敏感,脏样本也能做 回收率偏低,部分细胞粘在柱上或磁珠上
稀有细胞富集效率高 目标细胞无特异标志物时完全不可行
适用场景:需要高纯度目标细胞且下游耐抗体标记——细胞培养扩增、Western/流式分型鉴定、稀有细胞(CTC、祖细胞)富集、细胞株构建 适用场景:需要高纯度目标细胞且下游耐抗体标记——细胞培养扩增、Western/流式分型鉴定、稀有细胞(CTC、祖细胞)富集、细胞株构建
典型细胞:CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD19⁺ B、CD14⁺ 单核、CD34⁺ 造血干/祖、CD56⁺ NK(用 CD56 阳性分选需注意 NK 亚群差异)、磁珠标记不影响功能的细胞 典型细胞:CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD19⁺ B、CD14⁺ 单核、CD34⁺ 造血干/祖、CD56⁺ NK(用 CD56 阳性分选需注意 NK 亚群差异)、磁珠标记不影响功能的细胞
关键提醒:要测细胞因子分泌、要做体内回输、要做磷酸化蛋白检测时,阳性分选的抗体残留会干扰结果,此时优先考虑阴性分选 关键提醒:要测细胞因子分泌、要做体内回输、要做磷酸化蛋白检测时,阳性分选的抗体残留会干扰结果,此时优先考虑阴性分选
优点 缺点
目标细胞完全未被标记,保持天然状态 纯度通常 90%~97%,低于阳性分选
回收率高(常见 >90%) 需要混合抗体鸡尾酒,成本较高
无激活风险,适合功能实验 依赖“杂质标志物已知且完整”,杂质复杂时易漏
无需目标细胞的特异标志物 抗体cocktail 覆盖度决定成败,不同样本需换试剂盒
适用场景:下游对细胞表面状态敏感——流式细胞术(避免荧光竞争)、细胞因子检测、磷酸化流式、体内回输、原代细胞培养、代谢/功能研究 适用场景:下游对细胞表面状态敏感——流式细胞术(避免荧光竞争)、细胞因子检测、磷酸化流式、体内回输、原代细胞培养、代谢/功能研究
典型细胞:小鼠/人 T 细胞(Untouched T cell)、单核细胞、NK 细胞、B 细胞;所有需要“原始态”的细胞 典型细胞:小鼠/人 T 细胞(Untouched T cell)、单核细胞、NK 细胞、B 细胞;所有需要“原始态”的细胞
关键提醒:用抗体混合物标记所有非目标细胞(含磁珠),磁珠连同杂质被磁场吸走,目标细胞留在上清中,所以要区分出目的细胞在哪里,即磁珠标记的细胞为非目的细胞 关键提醒:用抗体混合物标记所有非目标细胞(含磁珠),磁珠连同杂质被磁场吸走,目标细胞留在上清中,所以要区分出目的细胞在哪里,即磁珠标记的细胞为非目的细胞
有柱分选(Column) 无柱分选(Column-free)
原理 磁珠标记后过分离柱,在强磁场中多次洗涤 磁珠标记后直接磁力架吸附,倾倒或吸出上清
纯度 更高(可达 97%~99%) 稍低(90%~97%)
回收率 较低(柱内滞留损失) 更高(>90%,损失少)
细胞状态 受剪切力与压力影响 更温和,细胞活性更好
操作 步骤多、耗时、需熟练度 步骤少、快速、批次波动小
无菌/封闭 需在生物安全柜内开放操作 可用封闭系统,适合临床级
成本 高(柱为耗材) 低
样本量 适合中小样本量 适合大体积样本

 

产品 货号
CD14 Nanobeads, human(RUO) S0K0004
Dead Cell Removal Set, (RUO) S0K0009
CD3 Nanobeads, human(RUO) S0K0011
CD8 Nanobeads, mouse(RUO) S0K0005
CD11b NanoBeads, human and mouse(RUO) S0K0007
CD8 Nanobeads, human(RUO) S0K0010
Mouse T Cell lsolation Kit (Column-Based) S0K1008
Human NK Cell Isolation Kit (Column-Based) S0K1009
Mouse CD4 T Cell lsolation Kit (Column-Based) S0K1005
Mouse CD8 T Cell lsolation Kit (Column-Based) S0K1007
Mouse Naive CD4 T Cell lsolation Kit (Column-Based) S0K1001
Mouse Naive CD8 T Cell lsolation Kit (Column-Based) S0K1002
Mouse T Cell lsolation Kit ( Column-Free) S0K3006
Mouse CD4 T Cell lsolation Kit (Column-Free) S0K3003
Mouse CD8 T Cell lsolation Kit (Column-Free) S0K3004
Mouse Naive CD4 T Cell lsolation Kit (Column-Free) S0K0014
Mouse Naive CD8 T Cell lsolation Kit (Column-Free) S0K3005

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