Recombinant Human MPLKIP蛋白怎么用

1. Human MPLKIP是什么？作用在哪个时相？

MPLKIP 全称 M-phase specific PLK1 interacting protein，按命名与 PLK1 相互作用，作用时相指向 M 期，研究多围绕细胞周期调控展开。货号 abs0712608 的 Recombinant Human MPLKIP 蛋白对应 UniProt Q8TAP9，覆盖 120 个氨基酸，理论分子量 56 kDa，种属 Human。序列里丝氨酸、脯氨酸与精氨酸出现频率较高，属偏亲水的区段，实验前先与 Q8TAP9 全长比对确定位置。

2. Recombinant Human MPLKIP蛋白怎么表达纯化？

货号 abs0712608 的 Recombinant Human MPLKIP 蛋白标注来源为 HEK293。哺乳动物细胞表达系统在处理带较多修饰位点的细胞周期相关蛋白时更合适，磷酸化类修饰也更容易保留。标签为 N-MBP&C-His，N 端 MBP 拉高融合蛋白溶解度，C 端 His 用于镍柱亲和捕获。洗脱收集主峰后，跑 SDS-PAGE 核对 56 kDa 条带，OD280 定量再分装。

3. MPLKIP重组蛋白能做哪些实验？

MPLKIP 重组蛋白能接六类实验：Co-IP 或 His Pull-down 验证与 PLK1 的相互作用；体外激酶体系里作候选底物，与 PLK1、ATP 共孵育后看迁移率变化；Western blot 验证抗体特异性；ELISA 包被筛杂交瘤上清；SPR/BLI 测结合亲和力；质谱鉴定磷酸化位点。做磷酸化相关实验时样品尽量一次取用，避免冻融使信号减弱。

4. MPLKIP蛋白怎么用PBS复溶与冻存？

产品页写明的复溶介质是 Phosphate buffered saline。开盖前先低速离心，把附着在管壁与管盖的粉末收拢到管底，再按目标浓度加入 PBS，室温静置几分钟，必要时轻柔吹打，不要涡旋。溶解后按单次用量分装，-20℃ 冻存，效期标注 12 months，并提示避免反复冻融。需要连续数日使用的可分小份放 4℃，用完即弃。溶解后先取少量跑一次 SDS-PAGE 确认条带位置，再决定分装体积，能少走弯路。

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