小鼠肝癌组织解离试剂盒，活性怎么保？

1. 小鼠肝癌组织解离试剂盒适合哪些下游实验？

货号abs50273的小鼠肝癌组织解离试剂盒由多种生物酶组成，可温和、快速、高效地将小鼠肝癌组织酶解并释放细胞，形成单细胞悬液。解离获得的细胞具有高活性并保留表面抗原，下游可衔接原代细胞培养、细胞分选、药物筛选与单细胞测序，应用方向为流式细胞术。产品为澄清液体，提供10T（10mL）与25T（25mL）规格，-20℃储存有效期6个月，干冰运输，建议到货后分装、避免反复冻融。

流程示意：箭头表示实验或信号传递方向

2. 酶解条件如何设置才能兼顾得率与活性？

酶解是把控得率与活性的关键。新鲜肿瘤组织浸泡于预冷组织保存液，4℃保存运输；转入预冷1×PBS清洗并去除脂肪与结缔组织。剪碎成0.5‑1mm³组织块，取约100mg入5mL离心管，加1mL解离液，37℃恒温摇床80rpm孵育30分钟，每10分钟上下颠倒；结束后用1mL移液器缓慢吹打10‑20次。使用前解离液需室温解冻并上下颠倒混匀，组织尽量剪碎以利充分接触。

3. Percoll密度梯度离心怎么配制？

细胞悬液用70μm筛网过滤至50mL离心管，加3‑5mL含10%FBS的RPMI‑1640冲洗筛网；4℃、400g离心5分钟弃上清，用4mL的40%Percoll重悬。取2.5mL的80%Percoll置于15mL管底，倾斜管壁缓慢叠加40%Percoll细胞混悬液形成密度梯度，室温800g离心20分钟，升速1、降速0，吸取中间层细胞，加预冷1×PBS混匀后4℃、400g离心5分钟弃上清。

4. 单细胞悬液质量如何用于流式与单细胞测序？

沉淀用适量细胞染色缓冲液重悬即可用于后续实验。Percoll需现配现用：Percoll细胞分离液与10×PBS按9:1配成等渗100%母液；再与RPMI1640或1×PBS按4:6配成40%溶液、按8:2配成80%溶液，注意勿破坏分界面。所获细胞可检测活力及CD45、CD3、CD4、CD8a、CD11b、Ly6C、Ly6G、CD140a、CD326、CD31等染色。产品仅用于科研，不用于临床检测。

爱必信产品推荐