西仑吉肽的概述与制备方法

西仑吉肽(Cilengitide)是一种人工合成的一个新类别抗癌药物。默克尔公司研究发现西仑吉肽联合化放疗(合并及辅助替莫唑胺加放疗)可能延长生存期，同时作为第一个整合素抑制因子抗肿瘤药物，已进入III 期临床试验，其重要机理是通过阻碍血管生长来靶 向作用于肿瘤及为肿瘤提供营养、促进癌症细胞生长的供血结构。

西仑吉肽 化学结构式

基本信息

中文名称：西仑吉肽

英文名称：Cilengitide

公司编号：GT-F053

CAS号：188968-51-6

序列：cyclo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-N-Me-Val)

分子式：C27H40N8O7

分子量：588.66

西仑吉肽制备方法

目前西仑吉肽的制备方法主要有液相合成工艺、固相合成前体肽在液相中环化工艺、固相合成工艺，其中前两种合成工艺都是合成的前体肽在液相中环化，这种方法需要反应物在极稀的溶剂中进行反应(10³~10⁴mol/L),而且分子间易发生反应生成线型或环状聚合物，极大地降低了环化收率，给后续的纯化带来了麻烦，而且在规模化生产中产生大量废液，不利于工业化生产。结合西仑吉肽的结构，利用固相假稀效益原理，开发了一种高效环化技术，环化时间缩短为液相环化的20%～30%,反应使用溶剂为液相的2%-8%。

西仑吉肽工艺流程图

1. 由替代度为0.4～0.9mmol/g的Wang Resin和Fmoc-L-Asp-OtBu反应制备Fmoc-L-Asp(OtBu)-Wang Resin。

2.通过固相逐步合成法依次偶联剩余4个含有Fmoc的氨基酸，得到西仑吉肽前体肽A-Wang Resin。

3. 在西仑吉肽前体肽A-Wang Resin中，分别加入脱Fmoc和OtBu的试剂，得到西仑吉肽前体肽B-Wang Resin。

4. 在DMF或DCM中加入西仑吉肽前体肽B-Wang Resin、环化试剂，经过反应得西仑吉肽-Wang Resin。

5. 裂解，纯化，冷冻干燥得到纯西仑吉肽。

上述西仑吉肽的固相环化合成工艺,其中步骤1)所述的Fmoc-L-Asp(OtBu)-Wang Resin, 是Fmoc-L-Asp-OtBu与Wang Resin在DCM或DMF中，在DIC+HOBT+DMAP作用下生成的。

步骤2)中使用溶剂DMF或DCM，偶联试剂C+D+E,其中C 为 HOAt 或 HOBt,   D为 HBTU 或 HATU 或 TBTU,E为 DIEA; 所述的Fmoc保护的氨基酸分别为：Fmoc-Gly-OH、Fmoc-L-Arg(Mtr)-OH、Fmoc-N-Me-L-Val、Fmoc-D-Phe-OH;Fmoc保护基的脱保护剂为体积 比25%的哌啶-DMF溶液。

步骤3)加入的脱保护基试剂分别为：体积比25%的哌啶-DMF溶液和PhOH-DCM溶液脱OtBu反应时间为5～8h。

步骤4)环化试剂为DPPA+DIEA或DPPA+NMM或DIC+HOBT或C+D+E,其中C为HOAr或HOBt,D为HBTU或HATU或TBTU,E为DIEA。

步骤5)裂解试剂为：TFA/H₂O/T1S。

与已有的传统的液相环化技术相比，本发明工艺具有操作简单、收率高、后处理简 单、反应时间短、产生废液少、成本低等优点，在环肽药物设计合成工艺领域有广泛的应用 价值。